本文从二倍体酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株C1出发,利用随机孢子分析得到了单倍体C1-系列菌株88株并进行了发酵效率测定。根据本实验室获得的最优原生质体制备条件,以C1-25、C1-88、C1-84、C1-14、C1-19、C1-74、C1-59七个高发酵效率单倍体菌株进行自身原生质体融合和筛选,获得了7个融合子C2～C8,经形态观察、细胞大小测量和DNA含量测定,初步断定它们是二倍体融合子。对这些菌株进行耐高渗压酒精发酵能力的测定分析,发现C7、C8的酒精发酵能力明显高于对照菌株C1。33℃发酵温度,小麦糖化醪糖度24°Bx的条件下进行边糖化边发酵,C7、C8经过72h的无氧发酵后酒精度达11.5%(V/V),糖转化率达96%,这比对照菌株C1(酒精度为11.0%(V/V),糖转化率87%)有更高的产酒精能力。此外,又对C1、C7、C8进行了酵母种子连续多次使用发酵实验,通过优化确定了20°Bx、25°Bx糖浓度小麦糖化液,PH6.0,温度33℃的发酵条件,经10批三角瓶和中空纤维膜超滤系统耦合生物反应器的高密度酵母高浓度酒精发酵试验,结果表明连续多次发酵中酵母细胞产酒精能力比较稳定,能够循环使用发酵。 实验结果显示:筛选到的二倍体菌株C7、C8菌株与亲株C1相比在耐高渗压能力、耐酸能力及耐酒精能力等方面有较大幅度提高,并且随着核倍性的增加有增强的趋势,而且它们都适应连续多次使用酵母工艺。