中药“十八反”理论是中药配伍禁忌理论的重要组成部分，“十八反”中相反药物配伍应用往往被视为禁忌。相反药物配伍应用后，可能导致疗效降低或毒副作用的产生或加强。人参与藜芦是中药“十八反”中经典相反药对之一，在实际临床中，却依然存在人参与藜芦合用治疗顽疾的例子，不但效果显著而且未见明显毒副作用。由于中药“十八反”的禁忌理论包含了多个药对，每个药对产生配伍禁忌的机理可能各不相同，使得有关中药“十八反”配伍禁忌合理性的研究成为当下研究的热点之一。中药中含有大量单体化学成分，配伍后复方中多种成分的组合，大大增加了研究药物相互作用机理的复杂性和困难性，因此，本研究以人参中主要成分人参皂苷和藜芦中主要成分甾体生物碱（藜芦胺veratramine）为切入点，从吸收和代谢过程中主要有效成分和配伍后多成分相互作用的变化规律，阐释两者可能的相反配伍机理，为丰富中医药配伍禁忌理论提供实验依据。　　目的:　　本文的目的是探讨基于吸收和代谢过程的中药“十八反”药对之一人参与藜芦配伍的相互作用机理。通过对藜芦中主要成分veratramine的代谢特征，生物药剂学及药代动力学性质进行考察，以期尝试揭示藜芦与禁忌配伍的人参合用后致毒/增毒作用机制;研究人参与藜芦配伍前后主要成分吸收变化规律，以期从吸收环节（成分体内暴露量）上诠释人参与藜芦配伍禁忌作用机理;以体内cocktail鸡尾酒探针药物实验，评价人参与藜芦配伍前后对肝脏P450同工酶活性的调控作用，以期从代谢角度诠释人参与藜芦配伍后可能的相反作用机理。　　方法:　　1) Veratramine是中药藜芦的代表成分，有抗肿瘤及抗高血压活性，但同样有明显的毒性，然而关于veratramine药代动力学特征，尤其是代谢特征的研究鲜有报道。本文首先应用人和鼠肝脏微粒体(microsomes)和胞质(cytosols)对veratramine的体外代谢轮廓进行了考察，并分别以20mg/kg的veratramine口服和50μg/kg的veratramine静脉给予SD大鼠，收集血浆、胆汁、尿液和粪便样品，用于探索veratramine体内代谢特征，与此同时，应用P450同工酶专属化学抑制剂和重组P450纯酶及SULT纯酶进行实验，进一步鉴定了veratramine代谢过程所涉及的代谢酶，同时考察了相应的酶动力学特征。　　2)本文进行了veratramine的生物药剂学及药代动力学特征的考察。以Caco-2单层细胞模型考察了veratramine的肠道吸收及转运机制。通过veratramine与雌、雄SD大鼠肝微粒体(RLMs)和肝细胞浆(RLCs)的孵育实验，探索veratramine性别差异代谢特征。Veratramine体内性别差异的药代动力学实验，雌、雄SD大鼠，每组各5只，给药前一天颈静脉插管，实验当天分别口服给予20 mg/kg及静脉给予50μg/kg的veratramine，给药后于不同时间点采集血浆，尿液，胆汁及粪便样品，样品中原型药物及代谢物浓度通过UPLC-MS/MS的方法进行测定，药代动力学参数通过KineticaTM进行计算。　　3)本文建立了UPLC-MS同时检测人参皂苷Rb1，Rc，Rd，Re，Rf, Rg1和veratramine等多成分的方法。雌雄SD大鼠分别给予生理盐水，人参提取物，藜芦提取物，及人参与藜芦混合提取物，应用建立的方法对给药后不同时间点的大鼠血浆样品进行浓度检测，计算相应药代动力学参数，比较不同组别间的差异。　　4)本研究采用体内cocktail鸡尾酒探针药物法考察了人参与藜芦配伍前后对肝P450酶CYP2C，CYP2D和CYP3A酶活性的影响。以探针底物的代谢物尿液累积量或代谢物的量与原型量的比值作为体内肝P450酶活性的判断依据。通过对比配伍应用前后酶活力的改变，揭示人参与藜芦在代谢过程是否发生相反作用及可能的作用机理。　　结果:　　1)本文在SD大鼠及人微粒体孵育实验中发现了veratramine的11个代谢物，其中包括7个羟基化代谢物，2个磺酸化结合代谢物及2个葡萄糖醛酸化结合代谢物。与多数生物碱不同，veratramine的反应位点主要发生在A和B环上，而不在含N杂环上。CYP2D6主要介导了veratramine的羟基化反应，并且veratramine对CYP2D6有一定抑制作用，酶动力学参数如下:Vmax，Ki和Clint的值分别为2.05±0.53 nmol/min/mg，33.08±10.13μM和13.58±1.27μL/min/mg。同时，SULT2A1主要介导了veratramine的磺酸化结合反应，酶动力学参数如下:Km, Vmax和Clint的值分别为19.37±0.87μM，1.51±0.02 nmol/min/mg和78.19±8.57μL/min/mg。　　2) Caco-2细胞单层模型实验研究结果显示，veratramine双向转运Papp值(apical-basolateral和basolateral-apical)分别为(1.51±0.14)*10-5 cm/s和(1.74±0.05)*10-5 cm/s，因此可以推测它是高渗透性药物，并且其肠道吸收主要靠被动转运方式。除此之外，veratramine的雌雄RLMs及RLCs孵育实验结果提示，7-hydroxyl-veratramine的生成是雄性占优势的，而 veratramine-3-O-sulfate的生成是雌性占优势的。口服veratramine后，雄性SD大鼠血浆和尿液样品中veratramine及主要羟基化代谢物7-hydroxyl-veratramine的浓度要显著高于雌性SD大鼠，而磺酸化结合代谢物veratramine-3-O-sulfate的浓度却显著低于雌性SD大鼠。从veratramine本身的药代动力学参数上可以看到，雄性SD大鼠中veratramine的Cmax，AUC，t1/2和MRT显著高于雌性SD大鼠，清除率显著低于雌性，终求得veratramine在雄性SD大鼠体内绝对生物利用度为23.1％，而雌性仅为2.1％。　　3)本实验建立了UPLC-MS方法同时检测人参皂苷Rb1，Rc，Rd，Re，Rf, Rg1和veratramine血药浓度。人参与藜芦配伍给予大鼠后，人参皂苷Rb1，Rc，Rd，Rg1和veratramine可以在血浆中检测到。对比各单用组，人参与藜芦合用后，人参皂苷Rd的AUC显著降低，而清除率有所增加，与此同时，从药时曲线及药代动力学参数变化趋势上也可看出，人参与藜芦配伍后人参皂苷Rb1和Rc的吸收有降低趋势;有毒成分veratramine的体内吸收显著增加（雄性大鼠）。　　4)对比空白给药组，人参给药组及藜芦给药组的肝脏CYP2C，CYP2D和CYP3A酶活性没有显著变化。但人参与藜芦配伍组对比其他组，其肝脏CYP2D的活性明显降低。　　结论:　　藜芦中主要生物碱veratramine的代谢特征，生物药剂学及药代动力学特性研究结果显示CYP2D6介导的羟基化代谢物7-hydroxyveratramine和SULT2A1介导的磺酸化结合代谢物veratramine-3-O-sul fate的生成是veratramine的主要代谢途径。而性别差异代谢及消除是veratramine性别差异药代动力学的原因。同时，veratramine也是CYP2D6和P-gp的抑制剂，因此含有veratramine的中药与其他药物合用时可能存在基于酶和转运体的相互作用。　　人参与藜芦配伍给药组实验结果显示，两味中药配伍应用后，人参中活性成分的吸收有所降低而藜芦中有毒成分的吸收有所增加，表明在吸收过程中人参与藜芦合用可能存在藜芦对人参活性成分吸收上的抑制作用，在一定程度上说明两者配伍将降低人参的活性，符合中医“七情”配伍中的相反理论;同时，在人参与藜芦单用组中，肝脏P450同工酶CYP2C，CYP2D和CYP3A酶活性没有被明显的诱导或抑制，但在人参与藜芦配伍组中，CYP2D酶活性却较明显地被抑制，表明在代谢过程中由于两者之间相互作用，抑制了CYP2D酶活性，增加了发生不良反应的风险，本项研究结果一定程度上从代谢角度证明了中医“人参反藜芦”即相反配伍理论的合理性。