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目的: HSPC238，又名RN181，RNF181，是一种新型C3HC4型锌指蛋白。锌指蛋白是一类重要的转录调控因子，是人类许多肿瘤发生的关键所在。研究发现锌指蛋白HSPC238的异常与肝癌、胃癌和大肠癌这些消化系统癌症的发生有关，本课题拟探讨HSPC238与宫颈肿瘤的关系，通过免疫组化实验、EdU增殖实验、Transwell侵袭实验、裸鼠成瘤实验和western blotting实验等研究HSPC238对宫颈癌细胞生长、增殖及侵袭等生物学行为的影响，并初步探讨其发挥作用的分子机制，从而为揭示HSPC238的功能提供更多的信息和线索。 方法: 1.宫颈组织免疫组织化学检测(ABC法) 收集76例宫颈癌、105例宫颈上皮内瘤变组织（简称CIN）及28例正常宫颈标本及临床相关数据，然后用ABC法对标本行HSPC238免疫组织化学染色，统计比较其表达水平的差异，以及比较宫颈癌组织中HSPC238的表达水平在不同病理分级中的差异，肌层浸润与否的差异，淋巴转移与否的差异。 2.质粒转染和鉴定 采用脂质体法分别将前期已构建好的pcDNA3.1-HSPC238质粒（以下简称HSPC238高表达）、pLL3.7-HSPC238载体（以下简称HSPC238干扰）以及相应对照质粒转染至Hela细胞，鉴定转染效果，以备后续实验时使用。 3.EdU细胞增殖实验 将HSPC238高表达组，干扰组及相应对照组的Hela细胞培养至适合的生长密度，然后用EdU法检测各组细胞的增殖能力，最后用荧光显微镜观察细胞的生长情况。实验重复三次，统计比较各组细胞的增殖水平。 4.Transwell细胞侵袭实验 将HSPC238高表达组，干扰组及相应对照组的Hela细胞培养至对数期，然后用Transwell法检测细胞的侵袭能力，结晶紫染色后，统计比较各组OD值。 5.干扰HSPC238对裸鼠移植瘤生长的影响 采用同体对照的方法，将HSPC238高表达组Hela细胞接种在裸鼠左侧前肢腋部皮下，对照组细胞接种在裸鼠右侧前肢腋部皮下。隔两日观察裸鼠的生长情况，测量移植瘤的体积。统计比较两组移植瘤的生长和体积是否有差异。 6.HSPC238对Hela细胞周期蛋白的影响 用逆转录PCR法(RT-PCR)和免疫印迹实验检测HSPC238高表达组、干扰组和相应对照组中HSPC238、Cyclin E1、p16、RB、E2F-1的mRNA和蛋白的表达水平，然后比较各组数据差异。 结果: 1.免疫组织化学染色 HSPC238的表达水平在正常宫颈组织和宫颈癌组织中无显著差异;在CIN与正常宫颈组织间有显著差异，并且发现HSPC238的表达水平与CIN的分级存在显著相关性，随着CIN级别升高，其表达水平降低;另外，宫颈癌组织中HSPC238的表达水平在不同病理分级中没有差异，在肌层浸润组和非肌层浸润组间没有差异，在淋巴转移组与非淋巴转移组也没有差异。 2.质粒转染和鉴定 成功构建并鉴定了HSPC238高表达和HSPC238干扰的Hela宫颈癌细胞株。 3.EdU增殖实验和Transwell侵袭实验 与对照组相比，高表达HSPC238可以使Hela细胞增殖和侵袭能力降低，反之，干扰HSPC238使Hela细胞增殖能力和侵袭能力增强。 4.裸鼠成瘤实验 与对照组相比，干扰HSPC238后裸鼠移植瘤的生长速度加快，瘤体体积明显增大。 5.HSPC238对Hela细胞周期蛋白的影响 高表达HSPC238后，Hela细胞中Cyclin E1、pRb、E2F-1蛋白表达水平增加，p16的表达水平无明显增加;干扰HSPC238后，Hela细胞中CyclinE1、pRb、p16蛋白表达水平也减少，E2F-1的表达水平无明显增加。而高表达或干扰HSPC238后，Hela细胞中CyclinE1、pRb、E2F-1和p16的mRNA水平均无明显变化。 结论: HSPC238的表达水平与宫颈上皮内瘤变的分级相关。HSPC238高表达时能抑制Hela细胞的增殖和侵袭，HSPC238低表达时促进Hela细胞的增殖和侵袭。低表达HSPC238对宫颈癌Hela细胞裸鼠成瘤具有促进作用。HSPC238能够影响细胞周期蛋白CyclinE1、pRb、E2F-1和p16的表达。HSPC238可能通过调控Hela宫颈癌细胞的细胞周期进而影响宫颈癌的进展。