番茄枯萎病是由尖孢镰刀杆菌(Fusarium oxysporum)引起的一种土传性病害,严重影响番茄的产量和品质。目前,对番茄枯萎病的防治仍以化学防治为主,而长期使用化学农药会严重破坏土壤生态环境,高浓度的农药残留甚至会危害人类的健康。在绿色环保、可持续生产理念被广泛认可的时代,人们越来越多地采用安全、无污染的生物防治措施。蚯蚓粪是有机废弃物经蚯蚓生物处理后排泄出来的颗粒物,除含有大量植物生长所需的营养物质外,还含有大量的有益微生物,是自然界中一座不可多得“菌库”。研究利用蚯蚓粪中的有益微生物进行土传病害防治,得到众多国内外同行的认可,蚯蚓粪资源的利用拓宽了有益微生物生物防治研究的渠道。本研究从蚯蚓粪中筛选出对番茄枯萎病有抑制效果的菌株、明确其分类属性,分析其抑菌机制,同时确定该菌株发酵培养的最佳配方和培养条件。本研究得到的初步结论如下:(1)从蚯蚓粪中共筛选出61株细菌,有42株细菌对番茄枯萎病有抑制效果,其中14株细菌对番茄枯萎病的抑制率大于30%。抑菌效果最好的菌株为第25号菌株(记作DX-25),在平板试验中,它对番茄枯萎病的抑制率达到了66.09%,且抑菌效果稳定。(2)对菌株DX-25进行16S r DNA测序,序列长为1488 bp,在Genbank上进行同源性比较,表明DX-25为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。(3)DX-25菌株具有良好的广谱性抑菌效果,能有效降低番茄枯萎病的发生。在盆栽条件下,对番茄枯萎病的治疗效果为61.82%,防治效果为70.91%。同时发现,低浓度的DX-25发酵液对番茄种子发芽有促进作用,而高浓度的发酵液对番茄种子发芽具有抑制作用。(4)DX-25可以有效诱导番茄过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、β-1,3-葡聚糖酶(GLU)、几丁质酶(CHT)和脂氧合酶(LOX)活性。对PPO、GLU、CHT和LOX酶活性的诱导能力要强于枯萎病菌,对POD、CAT、SOD和PAL酶活性的诱导能力弱于枯萎病菌。DX-25诱导的PPO、GLU和CHT酶活性的反应速度比枯萎病菌快24 h。同时,DX-25和枯萎病共同处理诱导PPO和GLU酶活性有协同增效的作用,其达到显著水平的时间较单接种枯萎病菌分别提前了48 h和24 h。(5)通过优化培养,DX-25对番茄枯萎病的抑制率由初筛的66.09%提升至74.17%。