本论文共有两个部分:第一部分:鄱阳湖九江市星子县区血吸虫生物防控资源的调查作者在江西省星子县鄱阳湖日本血吸虫病流行区采集湖北钉螺(Oncomelania hupensis)和外睾吸虫终末宿主鲶鱼(Parasilurus asotus),带回到厦门大学生命科学学院寄生虫动物研究室进行血吸虫生物控制的资源调查。使用光照尾蚴逸出法检查湖北钉螺的吸虫类幼虫感染情况,发现:在采集回来的9768颗钉螺中,共检查出有感染的阳性钉螺676颗,其中外睾吸虫阳性钉螺有501颗,占总的钉螺数目的5.12%;日本血吸虫阳性钉螺有175颗,占总的钉螺数目的1.79%。进一步分析阳性钉螺的构成,发现外睾吸虫阳性钉螺占总发现阳性钉螺的74.11%,日本血吸虫阳性钉螺占阳性钉螺总数的25.89%,外睾吸虫阳性钉螺的数目远远超过血吸虫。根据唐崇惕等(2008-2014)报道,外睾吸虫可以作为日本血吸虫生物控治的材料,调查结果显示外睾吸虫资源丰富,可以为进一步的研究提供便利。令人担忧的是在调查结果中,感染有日本血吸虫的湖北钉螺的数目仍然很高,预示着日本血吸虫感染人的几率也会很高,血吸虫病的防控力度有待加强,在现有的药物防控的方法之外,可应用资源丰富的外睾吸虫进行生物防控。外睾吸虫(Exorchisspp.)是寄生在鲶鱼肠道中的一类小型吸虫,作者通过剖检鲶鱼肠道,在采集的103条鲶鱼中,发现感染有外睾吸虫的有79条(74.11%)。实验中共收集到成虫684条,鲶鱼的平均感染强度为8.66条,从数据结果可以看出鄱阳湖区鲶鱼外睾吸虫感染率很高,可以为血吸虫生物控制提供丰富资源。第二部分:硫氧还蛋白(Thioredoxin Related Protein of 14 KDa,OhTRP14)在不同处理的湖北钉螺中分布的观察作者在本课题组前期工作的基础之上,首先通过免疫组化手段和实时定量荧光PCR(Real Time PCR,RT-PCR)观察了 OhTRP14蛋白在湖北钉螺体内不同组织的分布情况,发现OhTRP14蛋白主要在钉螺的消化道分布最为集中,其次是在消化腺中分布较多,在腹足部分也有分布,主要集中在体腔附近,肌肉部分的分布很少。运用点突变技术使TRP14蛋白活性位点-Cys-Pro-Asp-Cys-中第一个半胱氨酸(Cys,C)突变为丝氨酸(Ser,S),发现突变之后的TRP14蛋白催化胰岛素双链降解的活性丧失,不能继续催化氧化还原反应。构建基因干扰(RNA interference,RNAi)载体并处理生长状态良好的阴性钉螺,在第四天发现钉螺体内TRP14mRNA水平最低,测定活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)含量显示,在第四天钉螺血淋巴细胞的氧化还原状态最高;通过免疫荧光定位方法检测到TRP14蛋白在血淋巴细胞主要分布在细胞质中,以上结果说明TRP14蛋白参与了细胞的氧化还原状态的调节。之后,作者通过免疫组化,RT-PCR,免疫印迹(Western Blot)和测定ROS的方法,分别对血吸虫感染不同时期钉螺和外睾吸虫钉螺以及双重感染不同时期的钉螺进行分析,发现血吸虫感染后,钉螺组织TRP14分布没有变化,但是mRNA水平升高,TRP14蛋白表达量增加,ROS水平升高,说明寄生虫的感染可以引起宿主氧化还原状态的升高。通过观察外睾吸虫感染的湖北钉螺、日本血吸虫感染不同时间湖北钉螺以及双重感染的湖北钉螺,发现外睾吸虫阳性钉螺引起宿主的氧化还原反应变化最为强烈,其次是双重感染的阳性钉螺,血吸虫引起的相对较低,推测可能是较高的氧化压力促使了日本血吸虫的发育终止,并且使其体内所有结构解体。我们通过对外睾吸虫阳性钉螺进行RNAi处理,然后用日本血吸虫毛蚴进行感染,结果发现日本血吸虫胞蚴依然不能正常发育,猜测可能是外睾吸虫幼虫刺激钉螺分泌的其他物质导致了血吸虫幼虫的死亡。