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目的:探讨不同自噬程度对带状疱疹后神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)小鼠模型脊髓背角GABA能神经元的作用材料与方法:1.使用SPSS19.0的随机数字发生器将36只昆明小鼠随机分为生理盐水组(NS)、溶剂组(Solvent)与PHN组,每组12只。腹腔注射树脂毒素组(Resiniferotoxin,RTX)0.2μg/g的剂量构建PHN模型,Solvent组、NS组分别注射等体积的溶剂和生理盐水。每天定时用von-frey丝检测机械缩足阈值(Paw withdrawal mechanical thresholds,PMWT),热板法检测缩足时间阈值(Pain threshold in hot-plate test,HPPT)至疼痛稳定。然后分别处死各组小鼠,取脊髓L4~L6节段使用实时荧光定量PCR、免疫组织化学染色及western blot等方法检测LC3、beclin1的变化情况;透射电镜观察脊髓自噬小体。2.使用SPSS19.0的随机数字发生器将48只昆明小鼠随机分为PHN+Rapa组、PHN组、PHN+3-MA组及空白对照(Control,C)组,每组12只。C组不做任何处理,其余各组均在构建PHN模型成功后,连续14天分别腹腔注射1μg/(kg.d)的自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)、生理盐水和2μg/(kg.d)的自噬抑制试剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)。提取脊髓L4~L6节段,使用western blot检测LC3、beclin-1和SQSTM1/P62的表达情况;ELSIA法检测脊髓匀浆液与动脉血中β-内啡肽和P物质浓度;统计各组小鼠PMWT、HPPT。3.使用SPSS19.0的随机数字发生器将48只昆明小鼠随机分为C组、PHN+Rapa组、PHN组及PHN+3-MA组,每组12只。C组不做任何处理,其余各组均在构建PHN模型成功后,连续14天分别腹腔注射1μg/(kg.d)的自噬诱导剂Rapa、生理盐水和2μg/(kg.d)的自噬抑制剂3-MA。检测PMWT、HPPT至稳定后处死各组小鼠,提取脊髓L4~6节段western blot法检测抑凋亡蛋白bcl-2和促凋亡Bax的表达;荧光Tunel法检测脊髓凋亡细胞数;免疫荧光标记脊髓背角GABA能神经元数。结果:1、使用0.2ug/g的RTX后PHN组PMWT显著降低、HPPT显著增加(p<0.05),同时自噬相关蛋白LC3、beclin-1的m RNA和蛋白相对表达量显著性增加(p<0.05);2、在腹腔注射雷帕霉素后,PHN+Rapa组的LC3II、beclin-1蛋白质水平的相对表达量显著增加,SQSTM1/P62则显著性降低(p<0.05),PHN+3-MA组的LC3II、beclin-1蛋白质水平相对表达量显著降低、SQSTM1/P62则显著性增加(P<0.05);与C组比较,PHN+Rapa、PHN及PHN+3-MA组血清与脊髓匀浆液中的β内啡肽与P物质浓度均显著性增加(P<0.05)。与PHN组比较,PHN+Rapa血清与脊髓匀浆液中的β内啡肽显著性降低,而PHN+3-MA组则显著性增加(P<0.05)。PHN+Rapa组的血清与脊髓匀浆液中P物质浓度较PHN组显著性增加,而PHN+3-MA组则显著性降低(P<0.05);与PHN组比较,在PHN+Rapa组使用自噬诱导剂Rapa后PMWT显著降低、HPPT显著增加(p<0.05),PHN+3-MA组使用自噬抑制剂3-MA后PMWT则显著增加、HPPT显著降低(p<0.05);3、使用Rapa诱导PHN脊髓自噬后,PHN+Rapa组的bcl-2和Bax的蛋白相对表达程度均显著性增加,凋亡细胞数量显著增加,脊髓背角GABA能神经元数显著性减少(p<0.05)。使用3-MA抑制自噬后,PHN+3-MA组的bcl-2表达显著增加,而Bax则显著性降低。Tunel法检测凋亡细胞数量显著减少。免疫荧光检测脊髓背角GABA能神经元数显著性增加(p<0.05)。结论:1、腹腔注射0.2ug/g的RTX可以复制PHN小鼠模型;2、PHN小鼠模型脊髓自噬程度增加;3、脊髓自噬的过度激活促进了PHN的疼痛发生发展;4、PHN的自噬激活可能是导致脊髓GABA能神经元数量减少促进中枢敏化的重要因素之一。