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研究目的:观察丹酚酸B（salvianolic acid B,Sal B）对大鼠心肌缺血损伤的保护作用。从NLRP3炎症小体角度出发探讨丹酚酸B保护损伤心肌细胞的可能机制。为靶向炎症小体进行疾病的治疗及指导临床提供重要的参考。研究方法:研究共分为三章:第一章、异丙肾腺素（isoproterenol,ISO）诱导Sprague-Dawley（SD）大鼠复制心肌缺血损伤模型。通过心电图中T-波的变化值,大鼠血清心肌酶（CK、GOT和LDH）、氧化指标（MDA和T-SOD）和炎症因子IL-1β含量,心肌组织HE和TUNEL染色研究Sal B对缺血损伤心肌的保护作用;进一步应用免疫组化、western blot和real-time PCR检测心肌组织中炎症小体NLRP3相关蛋白和mRNA表达;探讨心肌缺血损伤与NLRP3炎症小体的相关性。第二章、建立H2O2诱导H9C2细胞氧化应激损伤模型和LPS+ATP联合诱导H9C2细胞炎性损伤模型。应用MTT法检测细胞存活率,试剂盒检测细胞上清液中氧化指标和炎症因子的含量观察Sal B对心肌细胞损伤的保护作用;应用western blot和免疫荧光研究Sal B对心肌细胞损伤过程中NLRP3炎症小体的影响;进一步应用TUNEL和Calciem-AM染色研究Sal B对细胞焦亡的影响。第三章、利用LPS+ATP联合诱导促进H9C2细胞中NLRP3炎症小体的激活,通过探针检测ROS和线粒体膜电位,western bolt分析SIRT1、p-Foxo3a和线粒体自噬相关蛋白,研究Sal B抑制NLRP3炎症小体的可能机制,进一步通过自噬抑制剂3-MA验证自噬在NLRP3炎症小体激活中的作用。研究结果:第一章结果显示:Sal B可以明显减轻心肌组织坏死、炎细胞浸润和减少DNA损伤,明显降低心电图中T波值（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,Sal B各剂量组的CK值、GOT值和IL-1β值,Sal B中、高剂量组的MDA值及中剂量组的LDH值均明显降低（P<0.05,P<0.01）;而Sal B中、高剂量组的T-SOD值明显升高（P<0.05,P<0.01）;Sal B给药组的心脏组织中NLRP3、ASC、caspase-1 P20和IL-1β蛋白和mRNA表达明显降低,呈一定的剂量依赖性（P<0.05,P<0.01）。第二章结果显示:经MTT法检测,确定H2O2合适的造模浓度为l00μM,时间为2h;SalB合适的预处理浓度为1、5、25μM,时间为24h。与H2O2模型组比较,给予不同剂量的SalB可以提高细胞的存活率,保持细胞形态的稳定性。与模型组比较,给予SalB可以明显降低H2O2刺激的细胞上清液中LDH、MDA水平,升高T-SOD的水平（P<0.05,P<0.01）,呈一定的剂量依赖性。Western bolt、免疫荧光和Elisa结果显示,Sal B可以抑制H9C2细胞氧化损伤和炎性损伤中NLRP3炎症小体的激活和IL-lβ的表达和分泌。TUNEL和Calcein-AM染色结果表明,Sal B可以保护细胞膜的完整性,减轻DNA损伤,从而抑制细胞焦亡。第三章结果显示:在LPS+ATP联合诱导作用下,Sal B可以促进H9C2细胞中SIRT1、p-Foxo3a和MnSOD表达的升高（P<0.05,P<0.01）,抑制细胞ROS和线粒体膜电位的升高,促进自噬标志蛋白LC3Ⅱ和Beclin-1以及线粒体自噬调控蛋白Parkin的表达,抑制P62和PINK1的表达（P<0.05,P<0.01）。在自噬抑制剂3-MA的作用下,Sal B（51μM）促进H9C2细胞线粒体自噬的作用被减弱,抑制NLRP3炎症小体激活的作用也明显被减弱。但是3-MA并没有影响Sal B对SIRT1和p-Foxo3a的促进作用。研究结论:1.Sal B可以抑制缺血心脏组织中NLRP3炎症小体激活,从而减轻炎症反应达到保护心脏的目的。2.心肌细胞氧化应激损伤时会诱导NLRP3炎症小体的激活,丹酚酸B可以保护H9C2细胞氧化应激损伤,抑制NLRP3炎症小体的激活。3.Sal B抑制H9C2细胞中NLRP3炎症小体活化的可能机制是激活SIRTl-FOXO3a-Parkin轴,改善心肌细胞线粒体自噬,减少受损线粒体的积累,从而抑制NLRP3激活信号的释放。