寒区富营养化水体中溶藻菌的分离和溶藻特性研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wukuiyuxin66666
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随着社会的进步,三废的排放扰乱了自然界亘古不变的循环。过度施肥,未经处理的污水即行排放和大气沉降是导致全球范围内特别是发展中国家水华现象严峻的始作俑者。水华藻的过度繁殖及其引发的水生生态系统的安全问题亟待解决。在传统方法治理水华,效果不理想的状态下,以微生物手段防控和治理水华势在必行。溶藻细菌具有专一去除水华藻的特点,是环境友好型抑藻方案,成本低,效率高,已获得国内外学者的深入研究和广泛认可。随着富营养化水体生物修复技术的飞速发展,以微生物手段治理水华,已趋于成熟,有望投入实践。本研究利用从吉林农业大学青湖中分离到的一株溶藻细菌,编号为A1,探讨其在溶解自然水体中分离得到的藻类和纯种铜绿微囊藻方面的机理和溶藻特性,并对其溶藻物质进行初步鉴定和毒性分析。主要研究结果如下:1从吉林长春某富营养化水体中分离出混合绿藻,并对其进行研究,观察藻细胞以及藻的生长特性,试验结果表明该混合绿藻在600nm-760nm之间的最大吸收波长为680nm。针对购自中国藻种库的铜绿微囊藻928进行研究并绘制铜绿微囊藻928生长曲线,发现该藻在自然生长的情况下大约6d进入对数生长期,此时的OD680约为0.2。2将采集于不同水域的水样预处理后从中提取细菌,并选择其中形态相似且数量占优势的水中常见菌进行溶藻试验,从中中筛选出一株具有溶藻特征的菌株A1,源自吉林省某大型池塘。以叶绿素a含量衡量藻细胞生长状况,最终确定菌株A1的菌悬液及无菌发酵液均有溶藻效果,并且无菌发酵液的溶藻效果更显著。该菌在菌悬液浓度高于1.0×107CFU/mL时,对微藻有显著的抑制作用,并且A1菌的菌体细胞能够利用铜绿微囊藻黄化后的藻细胞胞外代谢产物和藻残体,尤其在以藻残体为碳源的培养液中生长旺盛,并能分泌青绿色色素。3对A1进行初步鉴别,并对其生长过程中分泌的青绿色色素进行鉴定,经鉴别A1菌为革兰氏阴性杆菌,其青绿色代谢产物为脓青素,该菌适宜生长的pH值为5-8,并且在该范围内菌株A1适宜分泌脓青素。在相同条件下培养,菌株A1的葡萄糖、牛肉膏蛋白胨、淀粉培养基无菌发酵液中脓青素含量均较高。该菌株在培养结束后培养基的pH均趋于9,因此推断A1能分泌物质调节其生长环境的pH值。4对A1菌的无菌发酵液抑藻特征展开具体的分析,发现以一次性投加无菌发酵液的方式进行抑藻试验的溶藻效果优于连续分批次投加;针对相同体积的藻液,投加比例越大时抑藻效果越好,即投加无菌发酵液的初始量越大对微藻的去除率越高;不同藻液初始浓度对菌株A1的抑藻效果有影响,在加入相同体积,相同浓度的A1无菌发酵液时藻液初始浓度越低,抑藻效果越好;菌株A1无菌发酵液的光稳定性,热稳定性和酸碱稳定性均较好;改变培养基碳源、氮源组成对溶藻效果有影响,不同培养基培养A1菌后产脓青素的量之间有很大差异,其中葡萄糖、牛肉膏蛋白胨和淀粉培养基液体发酵后的A1菌无菌发酵液对铜绿微囊藻的抑制效果最好,此三种培养基培养菌株A1所得无菌发酵液中脓青素含量也较高;最后探讨不同培养基培养菌株A1所得代谢产物中脓青素的量与其相应的溶藻效果之间的关系,发现它们之间呈显著负相关,相关系数为-0.709*(P<0.05)。
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