论文部分内容阅读
前人在赖氨酸影响肉鸡生长发育及肉鸡赖氨酸需要量方面研究较多。而赖氨酸调控肉鸡生长发育及生理代谢等机能的分子机制尚缺乏系统深入研究。本试验在国内外相关研究的基础上,旨在通过评估赖氨酸对肉鸡生长发育,小肠氨基酸及小肽转运载体及肠道屏障相关基因表达,sIgA含量的影响以及赖氨酸缺乏对肉鸡盲肠微生物区系的影响,初步揭示日粮赖氨酸基于肠道机能与健康途径来调控肉鸡生长发育的可能分子机制。试验一赖氨酸对肉鸡生长发育、肠道氨基酸及小肽转运载体基因表达的影响试验选取1日龄360只AA肉仔鸡雏,随机分成3个处理组,每个组设6个重复,每一个重复有20只肉仔鸡雏。LL(赖氨酸缺乏)组、ML(赖氨酸适量)组、HL(赖氨酸过量)组赖氨酸水平分别为0.60%、1.00%、1.40%。对照组为ML组,试验组为LL组或HL组。试验期是21d。结果表明:(1)LL组肉鸡ADFI(平均日采食量)、ADG(平均日增重)、腿肌重、胸肌重、腹脂重、腿肌率、胸肌率极显著低于ML组(P<0.01),F/G(料重比)极显著高于ML组(P<0.01),HL组ADG极显著低于ML组(P<0.01)。LL组或HL组对腹脂率影响均不显著(P>0.05)。(2)LL组肝脏重、肌胃重极显著低于ML组(P<0.01),肌胃指数和心脏指数均极显著高于ML组(P<0.01),HL组肝脏重显著高于ML组(P<0.05)。LL组或HL组对肝脏指数、心脏重影响均不显著(P>0.05)。(3)LL组十二指肠PepT1、EAAT3、B~0AT,回肠PepT1、B~0AT基因表达极显著高于ML组(P<0.01),十二指肠CAT1,空肠PepT1、CAT1、EAAT3、B~0AT,回肠EAAT3基因表达极显著低于ML组(P<0.01),回肠CAT1基因表达显著低于ML组(P<0.05)。HL组十二指肠B~0AT、EAAT3、PepT1,空肠EAAT3、CAT1 mRNA表达极显著低于ML组(P<0.01),十二指肠CAT1,回肠B~0AT mRNA表达显著低于ML组(P<0.05),空肠PepT1、B~0AT,回肠EAAT3 mRNA表达极显著高于ML组(P<0.01),回肠CAT1基因表达显著高于ML组(P<0.05)。本研究结果表明,赖氨酸缺乏可能主要使空肠氨基酸及小肽转运载体mRNA表达下调,而过量可能主要使十二指肠氨基酸及小肽转运载体mRNA表达下调,影响蛋白质氨基酸利用,从而显著抑制肉鸡的生长发育。试验二赖氨酸对肉鸡免疫器官及肠道免疫的影响试验设计同试验一。结果表明:(1)与ML组相比,LL组脾脏重明显减小(P<0.01)、胸腺重明显下降(P<0.05),法氏囊指数明显增加(P<0.01),HL组对肉鸡免疫器官发育影响不显著(P>0.05)。(2)LL组空肠、十二指肠、回肠sIgA(分泌型免疫球蛋白A)含量极显著低于ML组(P<0.01),HL组回肠、十二指肠sIgA含量极显著低于ML组(P<0.01),空肠sIgA含量显著低于ML组(P<0.05)。(3)LL组十二指肠Claudin-1,空肠ZO-1、Occludin、Claudin-1,回肠Claudin-1、ZO-1基因表达极显著低于ML组(P<0.01),十二指肠ZO-1 mRNA表达显著低于ML组(P<0.05),十二指肠、回肠Occludin mRNA表达极显著高于ML组(P<0.01)。HL组肉鸡十二指肠ZO-1、Occludin,空肠Occludin表达极显著高于ML组(P<0.01),空肠ZO-1、Claudin-1,回肠ZO-1表达极显著低于ML组(P<0.01),回肠Claudin-1表达显著低于ML组(P<0.05)。(4)LL组十二指肠、回肠TNF-α,空肠INF-γ表达极显著高于ML组(P<0.01),空肠IL-10、TNF-α,回肠IL-10、INF-γ、IL-12表达极显著低于ML组(P<0.01)。HL组十二指肠IL-10 mRNA表达显著高于ML组(P<0.05),十二指肠、空肠TNF-αmRNA表达极显著高于ML组(P<0.01),极显著下调空肠IFN-γ、IL-10,回肠IL-10、IL-12 mRNA表达(P<0.01)。本研究结果表明,赖氨酸缺乏可能主要通过影响肉鸡空肠物理与化学免疫屏障相关基因表达,降低小肠sIgA含量,影响免疫器官发育,而赖氨酸过量则主要可能通过影响空肠和回肠物理与化学免疫屏障相关基因的表达,降低小肠sIgA含量来影响肠道屏障,降低肉鸡免疫机能。试验三赖氨酸缺乏对肉鸡盲肠微生物区系的影响试验选取240只1日龄健康AA肉仔鸡雏,随机将它们分成2个处理组,每个组设6个重复,每一个重复有20只肉仔鸡雏。D0、C0组的赖氨酸含量分别是0.60%、1.00%。对照组为C0(赖氨酸适量)组,试验组为D0(赖氨酸缺乏)组。试验期是21d。结果表明:(1)与C0组相比,D0组Alpha多样性指数均无显著变化(P>0.05),微生物群落结构差异显著(P<0.05)。(2)与C0组相比,D0组显著降低Alphaproteobacteria纲丰度(P<0.05),显著降低Bacteroides_uniformis种丰度(P<0.05),显著提高Tyzzerella属丰度(P<0.05)。结果表明:赖氨酸缺乏可能主要通过影响微生物群落结构,显著影响肠道菌群丰度,进而可能导致肉鸡肠道屏障功能降低,盲肠菌群比例失调,降低肉鸡免疫机能,进而可能阻碍肉鸡生长发育。