目的：获得体外培养的原代食管癌细胞,分析不同的细胞分离方法及培养基的选择对食管癌细胞体外原代培养成功率的影响,明确最佳的细胞分离及培养方法。并初步证实食管癌细胞体外致瘤能力的差异性。方法：选取5例经病理诊断证实的食管癌标本,每个标本分别用不同的细胞分离方法和不同的培养基培养；共分四组,A组：组织块法+含血清培养基,B组：机械法+含血清培养基,C组：组织块法+无血清培养基,D组：机械法+无血清培养基；并在显微镜下观察细胞的生长情况。每组细胞分别在接种1周、2周、3周、4周后,计数细胞总数和食管癌细胞数所占的比率,所得数据进行两因素水平的析因分析。用培养获得的食管癌细胞进行琼脂克隆,培养1周后,显微镜下计算细胞克隆数。结果：机械法原代培养所获得的食管癌细胞数高于组织块法,但差异没有统计学意义(50.03±3.1×104VS 40.98±4.9x104,P>0.05)。机械法食管癌细胞所占比例明显高于组织块法,差异有统计学意义(60.15±3.8%VS 38.02±2.9%,P<0.05)。含血清培养基对细胞生长的促进作用明显高于无血清培养基,差异有统计学意义(P<0.05)。无血清培养基与含血清培养基相比较对成纤维细胞的抑制作用明显,差异有统计学意义(P<0.05)。培养获得的食管癌细胞克隆形成率平均在20%左右。结论：机械法和无血清培养基在提高食管癌细胞体外原代培养的成功率上有优势。本实验培养的原代食管细胞其体外具有一定致瘤能力,细胞克隆形成率约20%。但与目前标准的食管癌细胞株体相比,致瘤能力较弱。