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溶胶-凝胶(Sol-gel)固定生物大分子是以四乙氧基硅烷(TEOS)或四甲氧基硅烷(TMOS)等硅氧烷前驱体为原料,通过一系列水解、缩合(缩聚)、老化形成凝胶网络的过程,在此过程中,凝胶围绕生物大分子并将其包埋其中。由于TEOS固定脂肪酶存在生物相容性较差等问题,因此本论文选用丙三醇改性TEOS并得到了生物亲和性较好的硅烷凝胶前体,然后以此进行固定化酶的研究,研究了固定化酶过程中的固定化工艺;并且对脂肪酶采用生物印迹方式诱导然后再进行固定化的研究,制备得到了酯化活性较高的丙三醇改性硅烷凝胶固定化生物印迹脂肪酶。首先,论文选用丙三醇改性TEOS得到亲水性硅烷凝胶前体,以改性后的产物溶解性为考察指标,采用红外光谱以及13C-NMR和1H-NMR进行化学表征,得到了丙三醇改性硅烷凝胶前体的最佳制备工艺:选择无溶剂体系进行反应,底物TEOS为50 m L,TEOS:丙三醇为1:0.25(mol:mol),5g 732型强酸性阳离子交换树脂,反应温度为50℃,水浴振荡器振荡速率选择为180 rpm,反应时间72 h。在此最适宜条件下制备得到的硅烷凝胶前体具有较好的亲水性,溶解性达到0.58 g/mL。然后,以丙三醇改性TEOS得到的亲水性硅烷凝胶前体为载体,进行了对假丝酵母脂肪酶固定化的工艺研究,以固定化酶催化酯化活性为考察指标,得到了固定化脂肪酶的最佳固定化工艺:0℃冰水混合浴条件下,改性硅烷凝胶与脂肪酶质量比为3:1,pH 7.8的磷酸盐缓冲液,80 mg致孔剂聚乙烯醇600(PEG 600),250μL硅烷偶联剂3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)。采用该条件下制备得到的改性硅烷凝胶固定化脂肪酶,其催化酯化活性是游离脂肪酶的1.42倍。最后,采用改性后的硅烷凝胶前体对生物印迹脂肪酶进行了固定化处理,通过固定化的方式保持印迹过程中酶与印迹配体结合时所处的最佳催化空间构象,探究了生物印迹过程对固定化印迹脂肪酶催化酯化活性的影响。讨论了固定化生物印迹脂肪酶印迹过程中的最佳工艺:选择橄榄油和棕榈酸甲酯双底物作为印迹模板,脂肪酶与印迹模板质量比为5:2、乙醇做助溶剂(印迹模板与助溶剂质量比为1:2),吐温-80(Tween80)作为表面活性剂,其用量为15 mg/mL,90 W功率超声辅助印迹6 min分钟、选择正己烷作为模板洗脱剂并采用超声去除模板。在该条件下制备得到的改性硅烷凝胶固定化生物印迹脂肪酶催化酯化活性是游离酶的3.84倍,是生物印迹脂肪酶的1.65倍。