【摘 要】
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目的观察慢病毒介导的SPARC基因敲减后,人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡的变化和对TGF-β及其受体的影响,并初步探讨其形成机制。方法将携带SPARC shRNA的慢病毒载体（LV2N-shRNA-SPARC,sh-SPARC组）及空载体（LV2-NC,sh-NC组）转染人瘢痕疙瘩成纤维细胞（HKF）,用未作任何处理的成纤维细胞作为空白对照组,用RT-PCR和Western blot法分别检测转染
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目的观察慢病毒介导的SPARC基因敲减后,人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡的变化和对TGF-β及其受体的影响,并初步探讨其形成机制。方法将携带SPARC shRNA的慢病毒载体（LV2N-shRNA-SPARC,sh-SPARC组）及空载体（LV2-NC,sh-NC组）转染人瘢痕疙瘩成纤维细胞（HKF）,用未作任何处理的成纤维细胞作为空白对照组,用RT-PCR和Western blot法分别检测转染后SPARC m RNA和蛋白的表达情况。用MTT法对各组细胞的增殖情况进行检测;用流式细胞仪测定成纤维细胞的周期及细胞凋亡;Western blot检测各组细胞中TGF-β1及TβRⅠ的表达。结果（1）SPARC-shRNA慢病毒载体感染人瘢痕疙瘩成纤维细胞后,sh-SPARC组细胞中SPARC m RNA和蛋白表达量明显低于sh-NC组及空白对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;（2）根据MTT结果,与对照组比较,sh-SPARC组细胞增殖减慢（P＜0.05）;（3）流式细胞术结果显示,sh-SPARC组成纤维细胞进入S期的比例低于sh-NC组和空白对照组（P＜0.05）;细胞凋亡率较对照组增加（P＜0.05）;（4）Western blot结果显示,sh-SPARC组TGF-β1及TβRⅠ的蛋白表达水平明显降低。结论敲减SPARC基因表达能抑制HKF细胞增殖,并阻滞细胞周期的进程,促进凋亡,其机制可能与TGF-β信号通路的下调有关。
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