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目的:将香芹酚及肉桂醛混合物制备成纳米乳以改善其水溶性差及不稳定的缺点,通过处方筛选及工艺优化制备出稳定性良好、质量可控的香桂复合纳米乳。对香桂复合纳米乳进行质量评价,考察其理化性质及稳定性。研究香桂复合纳米乳对LPS诱导的急性肠炎小鼠肠道功能的影响。方法:1.以离心稳定常数、粒径、多分散系数为指标,采用单因素及正交试验,筛选优化香桂复合纳米乳的处方和制备工艺参数;2.目测香桂复合纳米乳的外观形态,采用透射电子显微镜观察其显微形态;使用马尔文粒度仪测定香桂复合纳米乳的粒径、Zeta电位和多分散系数;采用气相色谱法对纳米乳中香芹酚和肉桂醛含量进行测定;采用超滤离心法测量香桂复合纳米乳中香芹酚、肉桂醛的包封率;采用影响因素试验、加速试验和长期稳定性试验对香桂复合纳米乳的稳定性进行考察;3.观测香桂复合纳米乳对LPS诱导的急性肠炎小鼠肠道功能的影响。ICR小鼠分为预防性给药组和治疗性给药组,均以藿香正气口服液(5.5 m L/kg·bw)为阳性药,预防组小鼠(0.51、1.02、2.04 g/kg·bw)连续给药7 d,末次给药后腹腔注射脂多糖(5 mg/kg·bw)6 h后处死取材。治疗组小鼠腹腔注射脂多糖(5 mg/kg·bw)引起急性肠炎,造模成功后,各给药组(0.51、1.02、2.04g/kg·bw)连续给药5 d,末次给药后禁食24 h处死取材。观测各给药组对ICR小鼠体重及采食量的影响。观察空肠组织病理形态,测量空肠绒毛高度、隐窝深度,并计算绒隐比(V/C)。利用ELISA法测定小鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α的含量,测定空肠中胰蛋白酶及糜蛋白酶活性。4.观测香桂复合纳米乳对LPS诱导的急性肠炎小鼠肠道微生物及其代谢产物短链脂肪酸的影响。采用16S r RNA法对治疗组小鼠粪便进行肠道菌群的检测,采用GC-MS测定治疗组小鼠盲肠内容物中短链脂肪酸含量。结果:1.香桂复合纳米乳的最优处方为:6.00%中链甘油三酯、6.00%香桂精油(2.00%香芹酚、4.00%肉桂醛)、5.00%吐温80、0.05%油酸、82.95%超纯水。通过高速剪切-高压均质法制备纳米乳,在10000 rpm转速下剪切5 min制备初乳;将初乳在500 bar下高压均质3次可制备得香桂复合纳米乳。2.香桂复合纳米乳外观为乳白色,显微形态为大小均一的圆球形。高速离心后未出现分层现象。香桂复合纳米乳粒径为(99.34±1.74)nm、多分散指数为0.088±0.014、Zeta电位为(-7.65±0.91)m V。香桂复合纳米乳中肉桂醛的含量为38.22 mg/g,包封率为(98.79±0.89)%、香芹酚的含量为19.95 mg/g,包封率为(99.81±0.97)%。稳定性试验结果表明,香桂复合纳米乳在强光照(4500 l X)及高温(40℃)条件下粒径明显增大,肉桂醛的含量明显降低;在加速试验(25℃±2℃)及长期试验(5℃±3℃)中,香桂复合纳米乳粒径、药物含量等指标均无明显变化,稳定性良好。3.预防性给药试验结果显示,经LPS刺激6 h后,模型组空肠黏膜固有层可见明显炎性细胞浸润,黏膜层可见核碎裂现象,绒毛高度和绒隐比(V/C)极显著降低(P<0.01)。造模前给药可有效防治绒毛高度与绒隐比(V/C)的降低,说明香桂复合纳米乳具有肠黏膜保护作用。经LPS刺激6 h后,模型组小鼠血清中促炎细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的含量极显著增高(P<0.01),抗炎细胞因子IL-10的含量极显著降低(P<0.01);而香桂复合纳米乳可显著降低小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量,显著升高IL-10的含量(P<0.05)。LPS刺激显著降低小鼠空肠内胰蛋白酶及糜蛋白酶的活性(P<0.01),香桂复合纳米乳可提高小鼠空肠内胰蛋白酶及糜蛋白酶的活性(P<0.01),有效缓解LPS刺激对小鼠空肠消化酶活性影响。治疗性给药试验结果显示,经LPS刺激后,小鼠体重和采食量显著下降。模型组较正常对照组空肠绒毛高度和绒隐比(V/C)比值降低(P<0.01)。血清中促炎细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的含量极显著升高(P<0.01),血清抗炎细胞因子IL-10的含量极显著降低(P<0.01)。小鼠空肠内胰蛋白酶及糜蛋白酶的活性显著降低(P<0.05)。经香桂复合纳米乳干预5 d后,小鼠体重及采食量升高,血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量极显著降低(P<0.01),IL-10的含量显著升高(P<0.05)。小鼠空肠内胰蛋白酶及糜蛋白酶的活性显著升高(P<0.05)。4.经LPS刺激后小鼠肠道微生物的多样性显著降低,肠道稳态遭到破坏,香桂复合纳米乳可恢复其肠道菌群多样性,提高有益菌的丰度,有利于维持小鼠的肠道稳态。模型组小鼠盲肠内容物中乙酸、丙酸、丁酸和戊酸的含量较正常组显著降低(P<0.05);经香桂复合纳米乳干预后显著提高乙酸、丙酸、丁酸和戊酸含量(P<0.05)。结论:通过优化香桂复合纳米乳配方和制备工艺参数,采用高速剪切-高压均质法制备得到稳定性良好、质量可控的香桂复合纳米乳,对其粒径、多分散指数、Zeta电位、包封率等进行检测,其结果符合2020版《中国药典》相关规定。香桂复合纳米乳可提高ICR小鼠采食量及体重,对LPS诱导的急性肠炎小鼠,具有改善空肠结构、上调消化酶活性、调节炎症因子水平的药理作用。香桂复合纳米乳可恢复急性肠炎小鼠肠道微生物群的多样性,增加其盲肠内容物中短链脂肪酸的相对含量。