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目的:采用一种新的定量分析冠微渗漏的方法……葡萄糖定量法,评价四种新型氢氧化钙类根管充填材料、五种充填方式根管封闭性能,并对比分析这四种氢氧化钙类根管充填材料根端钙离子释放能力,为临床医生选择更为合适的根管充填材料提供实验依据。
方法:
1 实验对象选取新鲜拔除的、牙体完整,无龋、无隐裂、根尖发育完全的成人离体单根管牙24颗(牙体长度在17~22 mm之间),除去牙体表面的结石和软组织,贮存于4%甲醛溶液中。
2 分组成人单根管离体牙24颗,随机分五个试验组,每组4颗,阴性对照组2颗、阳性对照组2颗。
3 离体牙根管预备
根管离体牙常规NSK高速涡轮机开髓、彻底清理牙髓组织后,使用K锉标准逐步后退法进行根管预备,主尖锉为40号,2%的次氯酸钠溶液、17%EDTA溶液交替冲洗根管,纸尖吸取根管内残留液体,备用。
4 离体牙根管充填
将新鲜配制的糊剂用比根管预备小一号扩大针捣入根管中至根管预备工作长度,彻底清除糊剂内气泡,并根据实验分组分别进行:CRCS糊剂+牙胶尖根管充填、Z/E CLASSIC糊剂+牙胶尖根管充填、Di/pex糊剂+牙胶尖根管充填、根管内填充填Di/pex糊剂、根管内填充填ENDOC/LEX PLUS糊剂;阳性对照仅牙胶尖根管充填,阴性对照组CRCS+牙胶尖充填根管后,根管腔上部用粘腊密封充填,并在牙根外表面(包括根尖孔)涂二层指甲油。其中糊剂+牙胶尖充填的试验组和牙胶尖充填的阳性对照组采用冷侧方加压方法进行根管充填。
5 根管微渗漏模型的建立
根管充填后完成的离体牙在37℃,100%的湿盒内贮存72h后,固定于一个底部开口的Eppendorf管底部,使约2/3的牙体置于管底之外,Eppendorf管的上部与一个透明的长约15cm的输液管相连,通过输液管向根管内注入1mol/L(含0.2%N/N<,3>)的葡萄糖溶液,直至输液管内的液面比根管内牙胶高15cm,输液管上方通过一个小孔与大气相通,整个试验中始终保持输液管内葡萄糖液面的高度不变。装有牙体的EppendOrf管固定于一个可密封完全的玻璃瓶,瓶盖上插一个27G注射针头与大气相通。将上述装置置于37℃饱和湿度的环境中,于第3,5,7,14,21,28d在玻璃瓶内各取样品500μl,每次取样后均补足去蒸馏水至1 ml。
6 冠微渗漏葡萄糖浓度的测定
采用葡萄糖己酸激酶终点法(GLU-HK)定量测定葡萄糖技术,在日立7170s全自动生化分析仪上检测第3,5,7,14,21.28d标本中的葡萄糖浓度。
7 根管释放钙离子浓度所谓测定
采用偶氮砷Ⅲ终点法定量测定钙离子技术,在日立7170s全自动生化分析仪上于第3,5,7,14,21,28d标本中钙离子浓度。
结果:
1 离体牙冠微渗漏检测
第3-28d 5个实验组均可检出葡萄糖渗漏,且随实验天数的增加,标本中可检测的葡萄糖浓度增加。
对各组第28d渗漏葡萄糖浓度检测结果进行方差分析得出:第28d时渗漏葡萄糖浓度:CRCS+牙胶尖组、Z/E CLASSIC+牙胶尖组、Diapex+牙胶尖组、Di印ex糊剂组、ENDOCALEXPLUS糊剂组与仅用牙胶尖根管充填组之间有统计学差异(p<0.05);CRCS+牙胶尖组、Z/E CLASSIC+牙胶尖组、Diapex+牙胶尖组之间无统计学差异(p>0.05);Diapex糊剂充填组、ENDOCALEX PLUS糊剂充填组之间无统计学差异(p>0.05);两个糊剂充填组:Diapex糊剂充填组、ENDOCALEXPLUS糊剂充填组与三个糊剂+牙胶尖充填组:CICS+牙胶尖组、Z/E CLASSIC+牙胶尖组、Diapex+牙胶尖组之间有统计学差异(p<0.05)。
2 离体牙根管释放钙离子浓度检测
第3-28d 5个组钙离子检出浓度随实验天数的增加而增加。
对各组实验第28d钙离子释放浓度检测结果进行方差分析得出:实验期第28d钙离子释放浓度CICS+牙胶尖组、Z/ECLASSIC+牙胶尖组、Diapex+牙胶尖组、Diapex糊剂组、ENDOCALEX PLUS糊剂组与仅用牙胶尖根管充填组之间有统计学差异(p<0.05);CRCS+牙胶尖组、Z/E CLASSIC+牙胶尖组、Diapex+牙胶尖组之间无统计学差异(p>0.05);Diapex糊剂充填ENDOCALEX PLUS糊剂充填与三个糊剂+牙胶尖充填组:CRCS+牙胶尖组、Z/E CLASSIC+牙胶尖组、Diapex+牙胶尖组之间有统计学差异(p<0.05);Diapex糊剂充填ENOCALEX PLUS糊剂充填之间有统计学差异(p<0.05)。
结论:
1 建立了离体牙定量评价根管冠微渗漏和根端钙离子释放的模型,方法简单易行,灵敏、准确,为评价根管封闭材料的性能提供了更客观、准确的技术方案。
2 通过对比4种新型含氢氧化钙类根管封闭剂、5种不同根管充填方法的根管冠微渗漏强度,发现在试验期内5个实验组均存在强度不等的根管冠微渗漏现象,且随实验天数的增加,根管冠微渗漏增加。CRCS+牙胶尖组(A组)、Z/E CLASSIC+牙胶尖组(B组)、Diapex+牙胶尖组(C组)之间在第28天时根管冠微渗漏无统计学差异;Diapex糊剂组(D组)、ENDOCALEXPLUS糊剂组(E组)之间第28天时根管冠微渗漏无统计学差异;两个糊剂充填组:Di印ex糊剂组(D组)、ENOCALEX PLUS糊剂组(E组)第28天时根管冠微渗漏程度高于三个糊剂+牙胶尖充填组:CRCS+牙胶尖组(A组)、Z/E CLASSIC+牙胶尖组(B组)、Diapex+牙胶尖组(C组),有统计学差异(p<0.05)。
3 通过对比4种新型含氢氧化钙类根管封闭剂、5种不同根管充填方法根端钙离子释放能力,发现在试验期内5个实验组钙离子浓度随实验天数的增加而增加。CRCs+牙胶尖组(A组)、Z/E CLASSIC+牙胶尖组(B组)、Diapex+牙胶尖组(C组)、Di印ex糊剂组(D组)、ENDOCALEX PLUS糊剂组(E组)第28天钙离子释放浓度高于仅用牙胶尖根管充填(F组);CRCS+牙胶尖组(A组)、Z/E CLASSIC+牙胶尖组(B组)、Diapex+牙胶尖组(C组)之间第28d钙离子释放浓度无统计学差异;两个糊剂充填组:Diapex糊剂组(D组)、ENDOCALEXPLUS糊剂组(E组)实验期第28d钙离子释放浓度高于S+牙胶尖组(A组)、Z/E CLASSIC+牙胶尖组(B组)、Diapex+牙胶尖组(C组),有统计学差异(p<0.05);肿OCALEx PLUS糊剂组(E组)在实验期第28d钙离子释放浓度高于Diapex糊剂组(D组)(p<0.05)。