趋化因子CXCL7在结直肠癌临床诊断、增殖、迁移及侵袭的作用研究

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目的:探究趋化因子CXCL7作为结直肠癌(colorectal cancer,CRC)生物标志物的诊断价值;比较CRC患者癌组织和癌旁组织的表达差异,并研究趋化因子CXCL7对CRC细胞生物学功能的影响。方法:ELISA法定量测量280名CRC患者和280名正常人群血清CXCL7的浓度,比较两组人群血清浓度的差异性,分析CRC患者血清CXCL7浓度与临床资料的相关性;通过测试队列、验证队列和交叉队列分析CXCL7的诊断效能;建立Logistic多元回归模型进行联合诊断,计算联合诊断因子,绘制ROC工作曲线,并计算AUC曲线下面积、灵敏度(Sensitivity)、特异度(Specificity)等指标;TNM、I-II、性别亚组分析进一步评价CXCL7的诊断效能;重新从不同医院选择CRC患者进行诊断试验,进一步检验CXCL7作为生物标记物的稳定性和外延推广价值。使用免疫组化法检测20名CRC患者癌组织和癌旁组织中CXCL7的表达情况,同时借助qPCR法测定患者癌组织和癌旁组织中CXCL7的表达水平,分析CXCL7在癌组织和癌旁组织的表达差异性。慢病毒转染构建LoVo过表达和Caco-2敲降稳转株;采用CCK-8、EdU染色及平板克隆形成实验测定CXCL7对CRC细胞增殖能力的影响;细胞划痕实验测定CXCL7对CRC细胞迁移能力的作用;Transwell实验测定CXCL7对CRC细胞侵袭能力的影响。结果:CRC组血清CXCL7平均浓度显著高于对照组,且随着TNM分期递增呈升高趋势(P<0.05)。CRC患者血清CXCL7水平与性别、TNM分期以及T分期有相关性(均有P<0.05)。测试队列、验证队列及交叉验证队列诊断试验说明CXCL7具有诊断CRC的潜能。CXCL7具有较高的诊断面积(0.862,P<0.05),联合诊断提高了诊断效能,亚组分析中CXCL7的稳定性较高。免疫组化法及qPCR结果显示CRC癌组织高表达CXCL7,qPCR及ELISA法说明CRC细胞株同样高表达CXCL7。CXCL7可以增强CRC细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论:CXCL7是较好的诊断CRC生物标记物,同时也是潜在的致癌作用靶点,可参与调控CRC的恶性表型。
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