ADPN、LEP、IR与NEB奶牛卵巢静止之间的关系

来源 :黑龙江八一农垦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kocis2815
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背景与目的:围产期是奶牛生产的关键时期,此期奶牛易发生能量负平衡(NEB),而NEB又会增加奶牛产后卵巢静止(IO)的发生,导致奶牛发情配种率降低,给奶牛业造成巨大的损失。尽管奶牛产后卵巢静止的病因学已有较多研究报道,但是目前奶牛NEB、脂联素(ADPN)与瘦素(LEP)及胰岛素抵抗(IR)之间的关系及其对卵巢静止性乏情的影响仍不清楚。因此,本研究应用血液临床病理学、免疫学和分子生物学的技术研究ADPN、LEP、IR与NEB奶牛卵巢静止的关系,为今后深入研究奶牛产后卵巢静止性乏情的发生机制和预防新措施奠定基础。方法:本研究在黑龙江省某一大型集约化牛场选择前胎泌乳量9吨以上的经产荷斯坦奶牛为试验动物。试验奶牛在产后14 d根据血浆BHBA和Glu的水平,被分为能量正平衡组(PEB)和能量负平衡组(NEB),每组30头。随后,将PEB和NEB试验奶牛根据是否发生IR又分为IR组和无IR组,每组30头。然后,在试验奶牛产后50-60d,根据是否发情和卵泡发育状况,再分出NEB的卵巢静止组(NEB-IO)和PEB的发情组(PEB-E),每组6头。而后,应用生物化学方法检测试验奶牛血液生化指标(Glu、BHBA、ADPN、LEP、NEFA、E2、P4、INS、IGF-1、GH)的水平,应用荧光定量PCR和Western Blot方法分别检测NEB-IO和PEB-E两组奶牛脂肪组织和卵巢组织的ADPN和LEP的基因和蛋白的表达水平,应用免疫组化方法检测这两个组织的ADPN受体水平,所有数据经独立样本t检验和皮尔逊相关分析以及ROS分析,确定血液生化指标的变化和相互关系以及进行疾病发生的风险预警评估。结果:(1)NEB奶牛产后体况损失增大,生产性能降低。同时,产后21 d和50 d血浆中LEP、ADPN水平均降低,血浆中IR指数、TG、NEFA、BHBA、INS、GH都升高,而TC、Glu、E2、IGF-1和LEP都降低(P<0.01)。这表明NEB引起奶牛能量代谢异常、胰岛素抵抗、脂肪细胞因子、生殖激素和代谢激素的失调,导致奶牛产后IO的发生。(2)奶牛产后NEB使IO发生的风险增加4.33倍,使IR发生的风险增加2.7倍;IR使IO发生的风险增加3.2倍;NEB使血浆LEP或ADPN含量异常的风险增加3.33倍或4.5倍。这表明NEB或IR是奶牛IO发生的重要风险因素,NEB还是奶牛IR发生或LEP和ADPN含量异常的重要风险因素。(3)NEB组和PEB组奶牛血浆中IR指数与NEFA、BHBA或Glu呈正或负相关,E2、P4、GH、ADPN、LEP呈负相关(P<0.01)。在NEB或NEB-IO奶牛发生IR时血和卵泡液中ADPN、LEP都降低,卵泡液中E2、P4也降低(P<0.05)。这表明IR加剧奶牛能量代谢障碍、脂肪细胞因子异常、生殖激素失调,从而促发IO的发生。(4)NEB-IO组奶牛脂肪组织和卵巢组织中ADPN和LEP的m RNA水平,脂肪组织、卵巢组织、卵泡液、血清中ADPN与LEP的蛋白水平,以及卵巢组织中ADPN水平都显著减少(P<0.05)。这表明ADPN、LEP在奶牛IO发生中的分子调控作用。(5)奶牛IO发生的风险预警单一指标为奶牛产后14天,ADPN>2.365 mmol/L、LEP>5.565 mmol/L或IR指数>3.796,具有一定的诊断意义;联合指标判定指标为LEP+ADPN,或LEP+ADPN+IR,可以提高诊断的特异性和使用价值。结论:NEB是奶牛IO和IR发生的重要风险因素,而IR也是IO的重要风险因素,NEB、IR、脂肪细胞因子(ADPN、LEP)之间相互关联在奶牛产后IO发生中起着的重要作用,并确定了奶牛产后IO发生的风险预警评估指标及其阈值,为今后更有效的防治奶牛产后卵巢静止性乏情奠定了理论基础。
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