目的探讨间充质干细胞(MSCs)联合内皮祖细胞(EPCs)体外促进组织工程血管化。方法1.分离、培养来源于4-6周龄小鼠骨髓MSCs和EPCs;2.显微镜下MSCs和EPCs细胞形态学的观察;3.流式细胞仪(Flow cytometry)检测MSCs和EPCs表面标记物;4.无纺布聚乙醇酸支架(PGA)的处理;5.细胞接种:实验分为MSC组、EPCs组、MSCs+EPCs组,单一培养组取第3代MSCs和EPCs,分别按3×106个接种于无纺布聚乙醇酸支架(PGA)上后体外培养8周(MSCs+EPCs组按1.5×106个以1:1的比例共同接种);6.细胞-支架复合物常规切片行HE染色,显微镜下观察组织形态。通过免疫组化染色评价CD31在各实验组中的表达情况;7.数据处理及统计学分析(SPSS 17.0)。结果1.利用全骨髓贴壁法结合差时贴壁法可有效分离和扩增MSCs和EPCs。流式细胞仪分别检测细胞表面标记物,第3代MSCs高表达Sca-1、CD29和CD44,符合MSCs特性,第3代EPCs高表达CD309、CD34和CD133,符合EPCs特性。2.组织形态学观察可见MSCs+EPCs组的细胞数目及组织形态较MSCs组、EPCs组多且规则,PGA代谢产物已基本完全降解。3.免疫组化染色结果显示,CD31在MSCs联合EPCs组中的表达均高于EPCs组,且EPCs组高于MSCs组,差异有统计学意义(P<0.0001)。结论MSCs联合EPCs体外可促进组织工程血管化,且其增殖分化和促血管生成能力高于单一培养组。