【摘 要】
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目的:本课题组前期已经在STZ诱导的糖尿病大鼠模型层面证实了血管紧张素（1-7）可以下调JNK、Caspase3表达,从而降低血糖,减轻胰岛素抵抗,减少胰岛β细胞的凋亡,本研究将在INS-1大鼠细胞层面,验证血管紧张素（1-7）通过JNK/Caspase3信号通路影响胰岛β细胞的活性和功能。方法:于12%胎牛血清的RPMI1640完全培养基中培养大鼠INS-1胰岛素瘤细胞株,在的细胞培养箱（37℃
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目的:本课题组前期已经在STZ诱导的糖尿病大鼠模型层面证实了血管紧张素（1-7）可以下调JNK、Caspase3表达,从而降低血糖,减轻胰岛素抵抗,减少胰岛β细胞的凋亡,本研究将在INS-1大鼠细胞层面,验证血管紧张素（1-7）通过JNK/Caspase3信号通路影响胰岛β细胞的活性和功能。方法:于12%胎牛血清的RPMI1640完全培养基中培养大鼠INS-1胰岛素瘤细胞株,在的细胞培养箱（37℃,5%CO2）中培养,间隔48h换液继续培养,用0.25%（含EDTA）胰蛋白酶进行消化并按1:3比例传代。待细胞达对数生长状态时分A、B、C、D、E,5组进行种板、爬片,所有细胞在相同培养条件下培养12小时后分别进行干预,A组不做处理为对照组,B组加入终浓度为10-5mol/L的Ang-（1-7）,C组加入终浓度为30mmol/L的高糖溶液,D组加入终浓度为10-5mol/L的Ang-（1-7）+终浓度为30mmol/L的高糖（先加入Ang-（1-7）预先干预30分钟,再加入高糖溶液）,E组加入终浓度为10-5mol/L的Ang-（1-7）+终浓度为30mmol/L高糖+终浓度为10-5mol/L的sp600125（先加入sp600125预处理30分钟,再加入Ang-（1-7）干预30分钟,最后加入高糖溶液）,于细胞培养箱同等条件下共同培养48小时,相同方法重复4次。免疫组化法检测大鼠INS-1细胞JNK、Caspase-3蛋白水平并测出阳性率。结果:各组细胞JNK、Caspase3蛋白表达的比较:与对空白照组比较,Ang-（1-7）组细胞JNK、Caspase3蛋白表达无明显变化（P＞0.05）,高糖组细胞JNK、Caspase3蛋白表达明显增加（P＜0.05）,加入Ang-（1-7）可部分减少高糖诱导的JNK、Caspase3蛋白表达,而sp600125可以阻断Ang（1-7）的这种作用,使Caspase3蛋白表达增加（P＜0.05）。结论:验证了血管紧张素（1-7）通过JNK/Caspase3信号通路影响胰岛β细胞的活性和功能。
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