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背景与目的 食管癌是严重威胁人民生命健康的恶性肿瘤之一，平均发病率为14.59／10万。全世界每年大约有20余万人死于食管癌，我国每年死亡人数为15万，约占75％，为世界之最，其中鳞状上皮细胞癌占90％以上。因此，从分子水平寻找可用于食管鳞癌诊断的肿瘤标记物，研究其发生发展、浸润和转移的机制，具有十分重要的意义。 鸟氨酸脱羧酶(ODC)是生物体内多胺合成最重要的限速酶，它和多胺为细胞增殖所必需，生长旺盛的组织都可见二者含量明显增高。研究表明：在多种肿瘤组织中ODC活性明显增高，ODC过表达促进肿瘤浸润和转移。在食管鳞癌组织中ODC活性增高更为显著，并与其分期、淋巴转移、静脉浸润密切相关，但其在食管鳞癌浸润和转移中的作用机制尚不清楚。 血管生成是肿瘤得以迅速生长的关键，是肿瘤组织发生浸润转移的基础。微血管密度(MVD)就是对肿瘤血管最密集部位所进行的微血管计数，是公认的标志血管生成的指标。研究发现食管鳞癌中有浸润转移者微血管生成增多，MVD与食管鳞癌肿瘤大小、浸润深度和淋巴结转移有关。内皮抑素(endostatin)是从血管内皮细胞瘤中分离出来的一种多肽，它是胶原蛋白ⅩⅧ羧基末端的一部分，是目前发现的最强的血管生成抑制因子之一，能够抑制血管生成而阻碍肿瘤浸润和转移。它在食管鳞癌中的表达情况尚未见报道。郑州大学么叉只届硕士研究生毕业论文彭黝糖中鸟甸数挑踌mRNA、内皮抑素而州A晰效卿血管匆娜庆幽讲丸 己有研究发现ODC过表达可促进血管生成，并与肿瘤的浸润和转移有关，但机制不明。2002年，Nemoto等人研究ODC过表达的人癌细胞株时发现其内皮抑素和胶原蛋白X姗明显低于正常组织;同时可促使裸鼠肿瘤血管生成增加。作者提出:ODC过表达能够抑制内皮抑素而促进血管生成，这一假设尚未得到证实。 食管鳞癌中内皮抑素、ODC和血管生成的关系如何，目前尚未见报道。本文拟对ODC mRNA，内皮抑素mRNA和MVD在食管鳞癌中的表达及相关性作以探讨，以寻找可用食管癌诊断的肿瘤标记物，研究ODC过表达引起食管鳞癌的发生发展、浸润及转移机制，为食管鳞癌的临床诊治提供理论依据和治疗靶位。 方法研究对象为41例经手术和病理证实的食管鳞癌患者，用Rl下PCR方法测定每例患者癌组织(T)和相应癌旁正常组织(N)的ODC mRNA和内皮抑素mRNA表达，以p一actin mRNA做内参照求得各自刃N值;用免疫组化方法测定CD34抗原得到癌组织和相应癌旁正常组织的MVD，求得刃N值。 结果1、在41例患者中，39例ODC mRNA的1丫N值>LO，占95.1%，范围在0.87到n.30之间，平均值为4.69士2.44;2、癌组织中ODC mRNA表达明显高于癌旁正常组织，与食管鳞癌的大小、分化程度、外膜浸润和淋巴结转移有关，与性别无关;3、肿瘤直径)3 cm组癌组织的ODC mRNA的卫N值明显高于直径<3 cm组(P二0.046);4、低分化组的ODC mRNA的T/N值明显高于高中分化组‘ (P二0.012);5、外膜浸润组的ODC mRNA的T/N值明显高于无外膜浸润组(P=0.047);淋巴转移组的ODC mRNA的T月可值显著高于无淋巴转移组(P二0.031);6、36例患者内皮抑素mRNA的T/N值>1 .0，占87.8%，范围在0.3到 3.90之间，平均值为1.74士0.70;7、癌组织中内皮抑素mRNA表达明显高于癌旁正常组织，与食管鳞癌的大小、分化程度、外膜浸润和淋巴转移有关，与性别无关;8、肿瘤直径)3 cm组癌组织的内皮抑素mRNA的T/N值明显低于直径<3cm组 (P二0.002);9、低分化组的内皮抑素mRNA的到N值明显低于高中分化组 (P二0.015):10、外膜浸润组的内皮抑素mRNA的刃N.值明显低于无外膜浸润组(P二 0.023)，淋巴转移组的内皮抑素mRNA的TzN值明显低于无淋巴转移组 (P二0.028);11、40例患者MVD的T/N值>1.0，占97.6%，范围在0.98到6.2之间，平均值为3.09士0.98;12、癌组织中MVD的表达明显高于癌旁正常组织，与食管鳞癌的大小、外膜浸润和淋巴转移有关，与性别、分化程度无关;13、肿瘤直径)3cm组癌组织的MVD的T加值明显高于直径<3cm组(P二0.002):14、郑州大学刀】又届硕士研究生单甘狡督摺漪中鸟知瓤携酶mRNA、内皮抑素耐州A的表达和血管生成相关幽日F究外膜浸润组的MVD的卫N值明显高于无外膜浸润组(P二0.037)，淋巴转移组外膜浸润组的MVD的T/N值明显高于无淋巴转移组(P二0.020);15、ODC mRNA的毛N值与内皮抑素mRNA的刀N值负相关(?二一0.897，p<0 .01);16、ODc mRNA的T/N值与MVD的T胆值正相关(?= 0.593，p<0.01);17、内皮抑素mRNA的T胆值与MVD的T/N值负相关(?二一0.665，P<0.01)。 结论1、ODC的表达与食管鳞癌的发生发展、浸润和转移密切相关，可以作为食管鳞癌诊断的指标之一。2、内皮抑素和MVD与食管癌发生发展、外膜浸润和淋巴转移相关，可作为判断食管癌生物学行为的指标。3、ODC与内皮抑素负相关，与MVD正相关;提示ODC过表达通过抑制内皮抑素而促进血管生成，这可能是其促使血管生成的机制之一。