论文部分内容阅读
目的采用盲肠结扎穿刺(cecal ligation and puncture,CLP)法制作大鼠脓毒症模型,探讨糖蛋白(glycoprotein, GP)Ⅱb/Ⅲa受体抑制剂依替巴肽(Eptifibatide)对脓毒症大鼠肺、肝、肾损伤的保护作用,为脓毒症的临床治疗提供理论依据。方法64只成年雄性SD大鼠随机分为三组：假手术组16只,盲肠结扎穿刺(CLP)组和治疗组各24只,每组均分为6h、10h、14h和18h四个亚组(假手术组每个亚组均4只,CLP组和治疗组各亚组均6只),其中治疗组术后第4h、8h、12h和16h经大鼠尾静脉给予依替巴肽(7.5mg/kg)干预。各组大鼠手术后间隔不同观察时间放血后活杀,留取血清样本并取出待测肺、肝、肾组织,分别检测肺、肝、肾组织湿／干重比值(W/D)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、内皮细胞凋亡指数(apoptotic index,AI)和肺微血管通透性改变及肝肾功能变化,并进行三种组织形态学观察和病理评分。结果1.各组大鼠术后一般情况观察：假手术组大鼠术后复苏较快,饮食及活动未见明显异常,开腹后未闻及腹腔恶臭,未见肠管粘连、脏器水肿、腹腔积液等表现；CLP组术后有脓毒症表现,动物术后苏醒缓慢,随术后时间延长渐渐出现反应迟钝、竖毛寒颤、精神萎靡、呼吸急促等表现,开腹时可闻及恶臭味,可见腹腔大量浑浊血性积液,肠管严重粘连,结扎盲肠坏死变黑,肺、肝、肾等脏器充血水肿；与CLP组比较,治疗组大鼠术后损伤表现较轻。2.CLP后各种组织W/D值、MPO活性、内皮细胞AI及肺微血管通透性变化：大鼠肺、肝、肾组织6h出现损伤,各组织W/D值、MPO活性、内皮细胞凋亡指数(AI)及肺微血管通透性随术后时间延长持续增高,18h达到高峰。3.CLP后各种组织形态学和肝肾功能变化：CLP组肺组织6h可见部分肺泡扩张或塌陷；10h和14h可见较大面积的肺泡闭塞塌陷,且肺泡内红细胞渗出较明显,可有毛细血管淤血；18h可见较为广泛的肺间质充血、水肿,严重的肺泡内出血,以及局灶性肺不张和肺透明膜形成等。CLP组肝组织6h可见肝细胞体积增大,轻度肿胀,胞浆疏松化,小叶结构轻度紊乱,汇管区有少数炎细胞聚集；10h和14h见肝窦腔内和门脉区有大量炎细胞聚集,肝细胞有双核现象,甚至可见肝细胞嗜酸性变或嗜酸性坏死；18h可见肝窦间隙红细胞渗出,肝细胞点状坏死等。CLP组肾组织6h可见肾小球皱缩明显,肾小管上皮细胞变性,毛细血管淤血,随着时间延长逐渐加重,CLP组14h以后可见肾小管囊腔扩张,管型形成,肾间质有大量炎性细胞聚集,肾小管内有上皮细胞脱落,甚至肾小管坏死等。三种组织病理学评分随术后时间延长呈递增趋势,具有统计学意义(P<0.05)。CLP组10h后肝肾功能损伤显著,血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和尿素(BUN)水平明显升高(P<0.05),而肌酐(Cr)水平在CLP后14h出现显著升高(P<0.05)。4.治疗组肺、肝、肾组织各检测指标的变化：与CLP组比较,治疗组各观察时间点大鼠肺、肝、肾组织MPO活性显著降低(P<0.05),织组病理性损伤表现减轻,病理评分明显降低(P<0.05),致使各组织W/D值显著降低(P<0.05),肺组织血管通透性亦明显降低(P<0.05)；与CLP组比较,相对应观察时间点治疗组术后三种组织血管内皮细胞的凋亡率明显降低(P<0.05),肝肾功能损伤较轻,血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及尿素(BUN)水平在10h后升高明显降低(P<0.05),肌酐(Cr)水平在14h后升高亦显著降低(P<0.05)。结论1.脓毒症可以引起大鼠肺脏、肝脏及肾脏的损伤,导致大鼠肺、肝、肾组织W/D值、MPO活性、病理损害及血管内皮细胞的凋亡随时间延长进行性增加,表现为各种组织MPO含量、病理评分、血管内皮AI值以及肺微血管通透性随术后时间延长进行性升高,肝肾功能损伤加重。2. GPⅡb/Ⅲa受体抑制剂依替巴肽可以调节炎症反应,减少脓毒症大鼠肺、肝、肾血管内皮细胞的过度凋亡,改善肺微血管通透性和肝肾功能,对脓毒症大鼠肺、肝、肾脏器损伤有保护作用。