珍珠黄杨组织培养及种子休眠解除技术的研究

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珍珠黄杨(Buxus sinica var. parvifolia)叶片细密,枝干苍劲,树形稳定,生长缓慢,是具有较高应用和观赏价值的优美观赏树种,但这一树种的野生资源已濒于绝灭。为了保护这一树种,并满足园林绿化的需要,本论文从组织培养和解除种子休眠这两方面内容开展相关研究,以期为加快珍珠黄杨繁殖速度,扩大繁殖规模,进一步推动该珍稀树种的实际应用提供帮助。1.珍珠黄杨离体再生体系的建立通过正交试验设计并结合方差分析和多重比较,着重探讨珍珠黄杨组培过程中外植体消毒、最佳培养基配方及培养程序。结果如下:(1)去除种皮种子以0.1%升汞30min+0.1%升汞8min为最佳灭菌方案,污染率为5.83%;茎段灭菌以0.1%升汞3min+2%84溶液6min为最佳方案,污染率为25.5%,成活率为74.5%。(2)最佳启动培养基为MS+2.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA,出芽率达76.4%,出芽指数为1.71。(3)最佳取材季节为4、7月,污染率低,出芽率高。(4)最佳继代增殖培养基为MS+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2.0mg·L-1GA3,增殖倍数为4.28;最佳继代周期为30d左右,继代次数为4代。(5)最佳生根培养基为1/2MS+0.1mg·L-1NAA+20g蔗糖,生根率为73.6%,且根系粗壮。(6)炼苗用珍珠岩:细沙=1:1.5的混合基质,成活率为63.4%,植株长势良好。2.克服珍珠黄杨种子的休眠通过对珍珠黄杨种子生物学特性、外种皮抑制物质生物学测定,不同浓度赤霉素处理及不同层积处理,探讨了打破珍珠黄杨种子休眠的方法。研究结果如下:(1)种子千粒重为8.726g,纵径为4.356mm,横径为2.321mm。(2)种子具有一定透水性,所以其休眠不是因为种皮不透水引起的。(3)种子外种皮甲醇浸提液中含有某些抑制物质,可以抑制白菜籽的发芽。(4)种子具有上胚轴休眠的特性,萌发需要经过暖温(25℃)-低温(0~5℃)-暖温的过程。打破种子休眠的最佳方案为先用200 mg·L-1赤霉素处理48h再高温层积60d进行催芽,萌动率为90%;待根突破种皮,再将种子用400 mg·L-1赤霉素处理48h后低温层积30d,发芽率为82%。
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