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近年来,植物多糖和植物多酚因其纯天然、毒副作用少、疗效确切等优点,在抗肿瘤和抗氧化活性成分的研究与开发中越来越受到重视。本文以艾叶和香茅为研究对象,对分离纯化得到的艾叶和香茅有效成分进行了相应的生物活性研究。具体研究内容如下: 1、通过水提醇沉、三氯乙酸(TCA)除蛋白、ADS-7大孔吸附树脂脱色、DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析分离等步骤,从艾叶中分离得到了艾叶多糖FAAP-02。FAAP-02的平均分子量为16740 Da,由N-乙酰-D-氨基葡萄糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖和核糖等单糖组成。体外免疫调节活性研究显示,FAAP-02能够明显促进小鼠腹腔巨噬细胞的增殖能力、释放NO的能力以及吞噬中性红的能力,而且也能够促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞的增殖。S180荷瘤小鼠实验表明,FAAP-02对S180移植瘤有明显的抑制作用,高剂量组抑制率可达38.6%,并且明显延长了荷瘤小鼠的生存期。同时,FAAP-02还能够对抗因荷瘤或者由5-氟尿嘧啶(5-FU)所致的小鼠体内胸腺指数和脾指数、血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平,以及脾细胞中CD4+和CD8+T淋巴细胞表达水平的降低。但是,FAAP-02对体外培养的几种肿瘤细胞和正常细胞NIH3T3几乎无(或者很少)细胞毒作用。因此,FAAP-02具有明显的抗肿瘤和免疫增强活性,其抗肿瘤活性与免疫增强活性有关,而并非细胞毒作用所致。 2、通过水提醇沉、三氯乙酸除蛋白、ADS-7大孔吸附树脂脱色等步骤从香茅中分离得到了香茅多糖CCPS。体外免疫调节活性研究显示,CCPS能够明显促进小鼠腹腔巨噬细胞的增殖能力、释放NO的能力以及吞噬中性红的能力,而且也能够促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞的增殖。S180荷瘤小鼠实验表明,CCPS对S180移植瘤有明显的抑制作用,同时还能够对抗因荷瘤或者由5-FU所致的S180荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数、脾淋巴细胞增殖能力以及血清中IL-2、IL-6、IL-12和TNF-α分泌水平的降低。但是,CCPS对体外培养的S180细胞基本上无(或者很少)细胞毒作用。因此,CCPS具有明显的抗肿瘤和免疫增强活性,其抗肿瘤活性与免疫增强活性密切相关,也并非细胞毒作用所致。 3、采用Folin-Ciocalteu法、二苯基苦基苯肼(DPPH)法和2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法对香茅乙醇提取物各萃取部位的抗氧化活性进行评价,并通过ADS-7大孔吸附树脂,高速逆流色谱(HSCCC)和制备液相色谱等手段进行活性追踪分离,得到了四个多酚类化合物咖啡酸、绿原酸、2"-O-吡喃型鼠李糖-异荭草素和异荭草素。DPPH·和ABTS+·自由基清除实验研究结果显示,四个香茅多酚化合物均具有很好的抗氧化活性,其中异荭草素的活性最强;四个香茅多酚化合物与α-生育酚(VE)联用均具有一定的协同作用,其协同作用的情况与多酚化合物自身的结构以及参与反应的多酚化合物与VE的摩尔比例密切相关。四个香茅多酚化合物与VE协同清除DPPH·和ABTS+·自由基的作用机制研究结果显示,四个香茅多酚化合物在反应过程中均能促进VE的再生,使其继续发挥抗氧化作用,从而增强了抗氧化效果。