香芹酚对乳腺癌和子宫颈癌的作用及作用机制

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背景及目的乳腺癌和子宫颈癌是全世界女性相关癌症中死亡率的首位和第二位原因,目前多采用手术和放化疗等治疗措施,但是晚期癌症不能选择手术治疗,目前的化疗药物又有较多的不良反应,因此需要找到一个新型的化疗药物用于乳腺癌和子宫颈癌的治疗。中药材提取物的作用已被广泛的研究。关于香芹酚有抗癌、抗炎、抗真菌以及抗氧化等生物活性也有了很多研究。本文的目的就是为了探讨香芹酚对乳腺癌MCF-7细胞和子宫颈癌HELA细胞的作用以及作用机制,为乳腺癌和宫颈癌的治疗提供化疗药物以及理论基础。方法培养乳腺癌MCF-7细胞和宫颈癌HELA细胞,使用生长良好的癌细胞进行实验。将癌细胞放入96孔板或6孔板内24小时,使细胞贴壁后,以含不同浓度香芹酚的培养基处理乳腺癌MCF-7细胞和宫颈癌HELA细胞作为实验组,以未经药物处理的两种癌细胞为对照组,利用CCK8实验检测经过香芹酚处理的两种癌细胞的增殖情况,使用流式细胞仪测量经过香芹酚处理后的两种癌细胞的凋亡程度,利用划痕实验研究香芹酚对乳腺癌MCF-7细胞和宫颈癌HELA细胞迁移变化趋势的影响,用免疫印迹法检测给药后MAPK家族的表达情况从而探讨香芹酚对于这两种癌细胞的作用机制。结果1.CCK8实验的结果:子宫颈癌HELA细胞和乳腺癌MCF-7细胞按照104-105个平均铺入 96 孔板内,分为实验组(150umol/l、250umol/l、350umol/l、450umol/l、550umol/l、650umol/l)和空白药物浓度对照组,药物作用24小时后行CCK8实验。结果显示香芹酚抑制子宫颈癌HELA细胞和乳腺癌MCF-7细胞的增殖,且细胞存活率与药物浓度呈负相关。2.凋亡实验结果:子宫颈癌HELA细胞和乳腺癌MCF-7细胞按照5X 105个铺入 6 孔板内,分为实验组(150umol/l、250umol/l、350umol/l、450umol/l)和空白药物浓度对照组,药物作用24时后,使用流式细胞仪检测细胞凋亡的程度。实验结果为香芹酚对子宫颈癌HELA细胞和乳腺癌MCF-7细胞的作用是诱导其凋亡的。3.划痕实验结果:子宫颈癌HELA细胞和乳腺癌MCF-7细胞按照5X 105个铺入 6 孔板内,分为实验组(150umol/l、250umol/l、350umol/l、450umol/l)和空白药物浓度对照组,药物作用24小时后在显微镜下拍摄照片,结果显示为在香芹酚作用24小时之后HELA细胞的迁移率没有明显变化,而MCF-7细胞的迁移率受到了明显的抑制。4.免疫印迹法结果:子宫颈癌HELA细胞和乳腺癌MCF-7细胞按照5X 105个铺入 6 孔板内,分为实验组(150umol/l、250umol/l、350umol/l、450umol/l)和空白药物浓度对照组,药物作用24小时后提取蛋白,进行免疫印迹实验研究MAPK家族的表达水平。研究表明,用香芹酚处理之后的MCF-7细胞ERK1/2、JNK以及P38没有明显差异,但是P-ERK1/2、P-JNK以及P-P38的表达含量是明显降低的,且表达水平和香芹酚的浓度呈负相关;用香芹酚作用之后的HELA细胞的ERK1/2、JNK以及P38也无明显差异,但是,P-ERK1/2、P-JNK及P-P38的表达为先升高然后降低的趋势。结论在一定的浓度范围内,香芹酚抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,促进其凋亡,抑制细胞迁移的作用机制可能是通过调节MAPK家族中某些蛋白的表达水平来实现的;在一定的范围内,香芹酚可以促进子宫颈癌HELA细胞的凋亡,抑制细胞增殖的的作用机制可能是通过调节MAPK家族中某些蛋白的表达水平来实现的。
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