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背景 血管新生在人类健康中具有重要的生理学及病理学意义。生理学血管新生不仅在机体胚胎发育中起重要作用,是机体各组织器官发育分化的前提,而且是成人创伤愈合和女性月经周期正常维持的保障。而病理性血管生成则与人类多种疾病的发生、发展密切相关。如恶性肿瘤、糖尿病性视网膜病变、类风湿性关节炎。因此进行血管新生内皮靶标的研究具有重要意义。α7受体属于配体门控离子通道型受体,在中枢神经系统和外周神经系统具有十分重要作用,参与神经通路形成、维持和多种生理功能调节。而在非神经细胞-内皮细胞,α7受体参与内皮细胞多种生物活性物质的分泌和释放,参与内皮细胞与其他细胞间信号转导,参与内皮细胞血管新生调节,从而提出了血管新生内皮细胞乙酰胆碱新靶标。本研究首先以内皮细胞α7受体为靶标,HUVECs、心梗大鼠和荷瘤小鼠体内移植瘤为模型,了解α7受体在HUVECs、心梗大鼠内皮细胞基因及蛋白水平的表达及其配体的调节作用,以及α7受体在细胞机制和体内外血管新生中的调节作用。以探讨α7受体作为一种局部“荷尔蒙”受体,在内皮细胞上的药理学特征及其在血管新生中的调节作用。其次本研究对25种沙利度胺类新衍生物进行筛选,旨在发现具有抑制血管新生作用的先导化合物。 方法 1、RT-PCR和免疫组化测HUVECs α7受体mRNA和蛋白表达,并探讨烟碱、胆碱、美加明和α-BTX对α7受体表达的影响。共聚焦显微镜、MTT和体外血管索鉴定探讨α7受体对HUVEC细胞机制的影响。大鼠心梗模型和荷瘤小鼠体内移植瘤模型探讨α7受体与血管新生之间的关系。2、首先通过MTT法筛选25种沙利度胺类新衍生物中具有内皮细胞特异性抑制作用的新衍生物,随后通过荷瘤小鼠体内移植瘤模型了解具有内皮细胞特异性抑制作用的新衍生物对荷瘤小鼠体内移植瘤生长及移植瘤内毛细血管密度的影响。 结果 1、内皮细胞表达α7受体。2、在非兴奋性细胞-内皮细胞,激动剂上调α7受体表达,并能够促进胞内Ca2+释放、内皮细胞增殖及体外血管索形成,促进血管新生而促进侧枝循环的建立和肿瘤生长;拮抗剂作用反之。3、沙利度胺类新衍生物中W-37和W-42衍生物通过抑制荷瘤小鼠体内移植瘤血管新生而抑制移植瘤生长。