翻白草多酚的分离鉴定及生物活性研究

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翻白草(Potentilla discolor Bge.)是一种传统中药,具有抗菌、止泻、抗肿瘤、免疫抑制和降血糖等药理作用,广泛分布在中国、日本和韩国。本研究以翻白草为原料,研究了翻白草多酚的分离纯化工艺,鉴定了翻白草多酚的成分,并且比较了翻白草多酚纯化前后的抗氧化活性和抑酶活性,同时进一步探讨了纯化后的翻白草多酚对棕榈酸诱导的胰岛素抵抗Hep G2细胞的改善作用。本文研究结果为翻白草多酚作为天然抗糖尿病药物的研究与应用提供了理论依据。主要研究结果如下:1.翻白草预处理后,采用溶剂萃取法提取翻白草多酚类化合物,并用AB-8大孔树脂对其进行纯化。结果表明,用AB-8大孔树脂纯化后,翻白草多酚的含量从20.40±0.69 mg GAE/g DM提高至353.65±5.50 mg GAE/g DM。2.利用UPLC-QTOF-MS/MS鉴定翻白草多酚的成分,流动相为0.1%的甲酸水溶液(A)和甲醇(B)组成。共鉴定出35种化合物,包括12种酚酸及其衍生物和23种黄酮及其衍生物,其中29种化合物第一次被发现。3.通过DPPH·清除能力、ABTS·+清除能力、总的抗氧化能力以及α-淀粉酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性实验探究翻白草多酚纯化前后的抗氧化活性和抑酶活性。结果表明,纯化后的多酚提取物(PPE)有强的抗氧化能力和抑酶活性。4.本文进一步探究了纯化后的翻白草多酚(PPE)对胰岛素抵抗Hep G2细胞的影响,发现PPE可以改善胰岛素抵抗Hep G2细胞通过增加葡萄糖消耗和摄取、激活IRS1/PI3K/AKT信号通路,PPE可以作为一种潜在的治疗2型糖尿病药物。
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