卡巴他赛是经FDA批准用于治疗前列腺癌的一种新型紫杉烷类抗肿瘤药物,特别对多烯紫杉醇药物无效甚至耐药的晚期前列腺癌患者作用效果显著。但目前临床已经在用的卡巴他赛注射剂中含有增溶剂吐温-80,这使得部分患者在临床使用中易发生溶血反应,且卡巴他赛本身属于化疗药物,肿瘤选择性差,这使得其临床应用受到了极大的限制。因此,本课题拟制备卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒,通过制剂手段改善卡巴他赛的溶解性,提高卡巴他赛的体内生物利用度和临床安全性,增强卡巴他赛临床抗肿瘤的疗效,从而达到高效低毒的治疗效果,这将为卡巴他赛的进一步临床应用提供新的选择。第一部分,优化并建立卡巴他赛的体外含量测定方法,为下一步进行卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒的制剂工艺优化和质量控制提供支持;然后采用生物矿化法制备载卡巴他赛的牛血清白蛋白纳米粒,对纳米粒的包封率和体外泄漏率进行分析测定,对粒径、电位、包封率和载药量等性质进行表征,通过正交设计优化纳米粒的处方工艺。第二部分,对卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒的体外生物安全性和药效进行评价,通过体外溶血实验测定纳米粒的安全性,通过细胞摄取实验和细胞毒性实验测定纳米粒的药效。第三部分,开展卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒的体内药代动力学和组织分布研究,首先建立卡巴他赛的UHPLC-MS/MS含量测定方法,并进行方法学验证,然后通过测定注射给药大鼠后血浆中药物浓度,对比研究卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒和卡巴他赛吐温-80注射液的体内药动学行为;同时,构建裸鼠皮下前列腺癌模型,分别给药卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒和卡巴他赛吐温-80注射液后,于不同时间点采用UHPLC-MS/MS测定不同组织中卡巴他赛的浓度,表征卡巴他赛在不同组织中的分布情况。第四部分,构建裸鼠皮下前列腺癌模型,分别尾静脉注射卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒和卡巴他赛吐温-80注射液后,记录荷瘤裸鼠体重和肿瘤体积随时间的变化情况,对所构建卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒对前列腺癌的治疗效果及安全性进行评价。结果,所构建的卡巴他赛体外HPLC法含量测定方法专属性良好,线性、检测限、定量限、回收率、精密度、重复性等均符合要求,能够用于卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒中卡巴他赛的含量测定,采用生物矿化法制备卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒,并对其理化性质和体外溶血性能进行表征。结果表明,制得纳米粒的包封率为63.04%,载药量10.51%,平均粒径(166.1±4.7)nm,所制得的纳米粒的多分散系数(PDI)为0.256,Zeta电位为(-18.14±1.16)m V。24小时内粒径变化实验和体外泄露实验结果均表明纳米粒性质稳定,纳米粒驰豫评价结果表明,本项目制备的CBZ-BSA-Gd-NPs纳米粒具有较高的成像效能,有望辅助用于肿瘤诊断。卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒的体外溶血实验结果表明,与卡巴他赛-吐温80溶液相比,卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒的体外溶血作用显著降低;肿瘤细胞抑制作用结果表明,卡巴他赛制成纳米粒后其肿瘤抑制作用并没有降低,且具有更加的细胞摄取能力,因此可以在避免过敏反应的同时发挥更好的抗肿瘤作用;大鼠药代动力学实验结果表明,卡巴他赛载入白蛋白纳米粒后,与卡巴他赛吐温-80注射液相比,药物在体内的滞留时间延长,清除速度变慢,可以保持较高的血药浓度,药时曲线下面积提高,有利于药效的发挥。大鼠体内抑瘤实验结果表明,给药卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒后,与给药卡巴他赛吐温-80注射液相比,卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒在心、肝、脾、肾中的含量更低,在肿瘤组织中的含量更高,这主要是由于纳米粒的高渗透性和滞留效应,针对肿瘤组织具有被动靶向的治疗作用。综上,本研究所涉及卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒的制备方法简单、重复性高,无有机溶剂的加入,安全环保,制得的卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒可以显著延长卡巴他赛药物的体内作用时间,明显改善因为吐温80等增溶剂的加入所带来的肝肾毒性,还可减少溶血性等相应的不良反应,并且由于纳米粒中含有钆离子,卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒还可实现诊疗一体化,药理作用评价结果表明,在给药裸鼠前列腺癌卡巴他赛牛血清白蛋白纳米粒后,抑制肿瘤的作用比卡巴他赛-吐温80注射液更为显著。因此,可以达到高效低毒的治疗效果。