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一、研究目的自然界的水中氘(Deuterium, D)的体积分数为0.015%,而低于这个体积分数的水就称为低氘水(deuterium-depleted water, DDW)。氕和氘由于质量不同导致氢的这两种稳定核素之间物理和化学性质的不同。研究发现,饮用25%-30%重水可以提高腹水瘤存活期,抑制小鼠成纤维L929细胞的生长速率和引起移植瘤小鼠肿瘤组织消退。我项目组在国内率先进行研究。实验表明在体外情况下,低氘水对肺癌细胞增殖有抑制作用,而对正常细胞无影响,推测低氘水可能是通过将肿瘤细胞阻滞在S期,并促进肿瘤细胞凋亡而在体内外表现出一定的抗肿瘤特性。另外,低氘水也可以提高衰老模型小鼠心肝脑血中各种氧化指标含量,证实其具有一定抗氧化能力。本实验是在这些研究的基础上,对低氘水的免疫调节作用进行探讨,进一步解释其抗肿瘤特性,为今后辅助肿瘤治疗提供实验室资料。二、研究方法将ICR雄性小鼠(18-22g)随机分为对照组和实验组。两组均正常饲养,对照组以自来水作为饮用水,实验组以低氘水作为饮用水。饲养40d后,颈椎脱臼,进行下述免疫指标的测定。(一)非特异性免疫实验包括计算小鼠的脾脏指数,胸腺指数。(二)体液免疫实验包括ELISA法测小鼠外周血中免疫球蛋白IgM,IgG的含量。(三)细胞免疫实验包括MTT法测ConA刺激脾淋巴细胞增殖,迟发型变态反应(DTH),乳酸脱氢酶测NK细胞活性和流式细胞术测T细胞亚群CD4+,CD8+以及CD4+/CD8+的变化。(四)淋巴器官病理学改变及生理特征评价对两组小鼠的脾脏及胸腺进行染色,镜下观察病理学改变,并依据相关评分标准对生理特征进行评价。三、研究结果(一)非特异性免疫低氘水对脾脏指数有非常显著的提高(3.93±0.35)vs(3.45±0.28) (P<0.01),对胸腺指数的提高没有显著差异性。(二)体液免疫低氘水可以显著提高血清中IgM的含量(1.10±0.10)vs(0.97±0.05)(P<0.01),IgG的含量有提高但没有统计学意义。(三)细胞免疫用MTT法测定ConA刺激的小鼠淋巴细胞增殖,DNFB攻击小鼠两耳,以及LDH法测NK细胞活性,其结果均显示实验组和对照组没有显著差异。运用流式细胞术对T细胞亚群的数值进行测量,实验组中CD4+(67.69±7.83)vs(54.04±9.19)和CD4+／CD8+(2.31±0.84)vs(1.27±0.48)的含量显著高于对照组(P<0.05),而CD8+的含量则显著低于对照(P<0.05)。(四)淋巴器官病理学改变及生理特征评价经过HE染色,病理读片结果表明,受试物低氘水对小鼠脾脏和胸腺没有影响。生理特征评价表明低氘水不会对小鼠生理特征有损害作用。四、结论低氘水对特异性免疫和非特异性免疫均具有一定的免疫调节作用