无菌大鼠的人工培育及生物学特性的测定仙台病毒胶体金免疫层析方法的建立

来源 :北京协和医学院(中国医学科学院) 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:myloft1d
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大鼠是目前应用非常广泛的实验动物,而无菌大鼠由于排除了微生物的影响,作为实验工具有其独特的优势。随着对实验动物质量的要求越来越高,本土化无菌大鼠的大规模使用成为一种趋势。   针对这种趋势,我们在前人的工作基础上,改进条件,成功培育了无菌大鼠,并对其生物学特性进行了测定。实验中对2只怀孕大鼠进行了子宫摘除术,共得到大鼠胎儿36只,离乳18只,成活率为50%。2月龄后,将性成熟的F0代无菌大鼠进行兄妹间的交配,得到F1代无菌大鼠;同样的方法得到F2代无菌大鼠。分别对5周龄、8周龄的无菌大鼠取血和脏器测定血常规、血生化、凝血酶原时间、免疫指标和脏器系数。   这些指标将会为无菌大鼠的推广应用提供良好的基础数据。   仙台病毒是呼吸道病毒,是引起啮齿类动物呼吸道疾病的主要病原,也是清洁级以上实验动物必须排除的病原菌。目前检测仙台病毒的方法有很多,本试验旨在建立一种特异、敏感、快速的胶体金免疫层析检测法。   我们采用鸡胚培养获得含有仙台病毒的尿囊液,超速离心后制成仙台病毒抗原,备用。采用鞣酸-柠檬酸钠还原法制得10nm、16nm大小的胶体金颗粒,分别标记小鼠二抗和大鼠二抗。金标抗体制成以后组装试纸条:硝酸纤维素膜上分别包被仙台病毒抗原作为检测线T,小鼠一抗和大鼠一抗作为质控线C,然后硝酸纤维素膜上方黏贴吸水性能好的吸水纸,下方依次黏贴处理好的金标垫和样品垫。试纸条组装好以后,用仙台病毒阳性血清进行验证,在T线和C线上均出现红线。   该试验初步建立了用于仙台病毒检测的胶体金免疫层析方法,具有一定的方法比对意义和应用前景。
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