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大鼠是目前应用非常广泛的实验动物,而无菌大鼠由于排除了微生物的影响,作为实验工具有其独特的优势。随着对实验动物质量的要求越来越高,本土化无菌大鼠的大规模使用成为一种趋势。
针对这种趋势,我们在前人的工作基础上,改进条件,成功培育了无菌大鼠,并对其生物学特性进行了测定。实验中对2只怀孕大鼠进行了子宫摘除术,共得到大鼠胎儿36只,离乳18只,成活率为50%。2月龄后,将性成熟的F0代无菌大鼠进行兄妹间的交配,得到F1代无菌大鼠;同样的方法得到F2代无菌大鼠。分别对5周龄、8周龄的无菌大鼠取血和脏器测定血常规、血生化、凝血酶原时间、免疫指标和脏器系数。
这些指标将会为无菌大鼠的推广应用提供良好的基础数据。
仙台病毒是呼吸道病毒,是引起啮齿类动物呼吸道疾病的主要病原,也是清洁级以上实验动物必须排除的病原菌。目前检测仙台病毒的方法有很多,本试验旨在建立一种特异、敏感、快速的胶体金免疫层析检测法。
我们采用鸡胚培养获得含有仙台病毒的尿囊液,超速离心后制成仙台病毒抗原,备用。采用鞣酸-柠檬酸钠还原法制得10nm、16nm大小的胶体金颗粒,分别标记小鼠二抗和大鼠二抗。金标抗体制成以后组装试纸条:硝酸纤维素膜上分别包被仙台病毒抗原作为检测线T,小鼠一抗和大鼠一抗作为质控线C,然后硝酸纤维素膜上方黏贴吸水性能好的吸水纸,下方依次黏贴处理好的金标垫和样品垫。试纸条组装好以后,用仙台病毒阳性血清进行验证,在T线和C线上均出现红线。
该试验初步建立了用于仙台病毒检测的胶体金免疫层析方法,具有一定的方法比对意义和应用前景。