【摘 要】
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目的:通过荧光标记方法检测脂肪源间充质干细胞及磁珠与流式相结合技术分选的LSK细胞在清髓性预处理小鼠体内的归巢情况。方法:体外分离培养小鼠ADSCs、BMSCs、RF细胞,通过最
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目的:通过荧光标记方法检测脂肪源间充质干细胞及磁珠与流式相结合技术分选的LSK细胞在清髓性预处理小鼠体内的归巢情况。方法:体外分离培养小鼠ADSCs、BMSCs、RF细胞,通过最新的磁珠与流式结合分选技术分选出LSK细胞。将LSK细胞分别与ADSCs、BMSCs分共培养,于14d、35d分别计数LSK细胞总数,明确对其增殖情况的影响。使用活体荧光标记物DID及CSFE分别标记LSK细胞、ADSCs和RF细胞,经尾静脉分组注射LSK、ADSCs+LSK、RF+LSK入清髓性预处理的balb/c小鼠体内,喂养24小时后处死,制作蜡块病理切片,共聚焦分析荧光标记的细胞在小鼠体内的分布情况。结果:最新的磁珠与流式结合的分选技术明显可提高LSK细胞的获得率,ADSCs细胞在14d时对LSK细胞增殖作用不亚于BMSCs,而35d时ADSCs对LSK细胞增殖明显高于BMSCs,差异有统计学意义(p<0.01)。共聚焦检测小鼠体内荧光标记细胞,ADSCs组比起单独输注LSK及成纤维共输注组,明显促进造血干细胞的归巢,其分布主要在骨髓、脾脏、肝脏、肺脏中。结论:磁珠与流式相结合分选LSK技术优于传统单纯流式分选技术,ADSCs体外长期支持造血作用优于BMSCs,ADSCs可以促进造血干细胞在体内的归巢。
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