MiR-34a在人膀胱癌组织中的表达

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目的:微小RNA(microRNA,miRNA)是近年来发现的一类约21-25个核苷酸长度的内源性非编码小分子RNA,miRNA的5’-非翻译区的2-7个核苷酸的“种子序列”可以与靶mRNA的3’-非翻译区互补结合,在转录后水平上抑制靶基因的表达。近年来研究显示,miRNA在细胞的生长、分化、增殖、和凋亡过程中发挥着重要调节作用,并与许多肿瘤的发生、发展有关。miRNA在肿瘤中发挥着相当于癌基因或抑癌基因的作用,调节着肿瘤细胞多种重要的生物学行为。膀胱癌是泌尿外科最常见的恶性肿瘤之一,目前研究发现了一些在膀胱癌中异常表达的miRNA,其在膀胱癌的发生、发展过程中发挥着重要的作用。随着对miRNA在膀胱癌发病分子机理的深入研究, miRNA在膀胱癌的基因诊断和治疗中将发挥越来越大的作用。在本研究中,我们参考国内外相关文献及前期关于膀胱癌miRNA表达谱的研究,初步确定miR-34a为我们研究的重点。利用实时定量PCR技术检测膀胱癌组织相对于癌周非瘤组织中miR-34a的表达及其与临床病理资料的联系,初步探讨其在膀胱癌发生、发展中的作用。方法:收集42例膀胱癌手术患者肿瘤及周围非瘤组织手术标本,经提取RNA,加尾,抽提纯化,反转录后,运用荧光定量Real-time PCR检测miR-34a在膀胱癌组织中及癌周非瘤组织的表达水平,采用2△△C t算法计算膀胱癌组织与癌周非瘤组织中miR-34a表达量的比值,结合术后病理参数,运用统计学方法分析miR-34a与临床病理资料之间的相关性。并通过细胞转染将miR-34a成熟体和反义链转入膀胱癌T24细胞,通过MTS法、流式细胞术等方法检测其生物学行为的改变。采用SPSS13.O统计分析软件进行统计学处理,根据不同的数据类型选择不同的统计方法:计量资料用均数±标准差(Mean士SD)表示,采用独立样本t-test或Mann-Whitney U test分析实验组和对照组间的关系,P<0.05为有显著差异。结果:人膀胱癌组织miR-34a较其相应周围非瘤组织明显低表达,42例膀胱癌组织中,26 (61.9%)例miR-34a显著低表达。经统计学分析,miR-34a的低表达与肿瘤大小和恶性程度显著相关,肿瘤越大、恶性程度越高,miR-34a的表达量越低。转入miR-34a成熟体的膀胱癌细胞T24的生长增殖水平显著降低,细胞凋亡率明显高于对照组。结论:膀胱癌组织中miR-34a明显低于癌周非瘤组织中miR-34a的表达,并且miR-34a的低表达与肿瘤大小及恶性程度相关。miR-34a在膀胱癌细胞中能够起到抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。
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