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微流控电泳芯片的手性分离方法是新近兴起的一种手性分离新方法。它是指在方寸大小的微流控芯片上实现光学异构体的手性分离,是一门结合了现代微流控电泳芯片和手性分离两项技术的高通量、快速手性分离新方法。其中,微流控电泳芯片是分析化学领域上世纪九十年代初兴起以传统电泳为基础快速高效分析技术,也是微全分析系统(μTAS)的一个重要部分。而μTAS则是指集成了进样,分离,检测,甚至样品前处理等功能,力求发展成为“微而全”的分析新手段。它以样品消耗量少、分析速度快、分析样品通量大为显著特点,是实现分析化学技术“平民化”的重要途径。另外,由于手性分离方法在医药和生物化学领域的重要性,使得人们对各种手性分离方法的研究日趋重视。现今最强有力的手性分离手段就是能够结合于微流控芯片中的电泳分离技术,这给微流控电泳芯片实现快速高效的分析提供了契机。由此而发展起来的微流控电泳芯片手性分离分析方法学成为现代分析技术的研究热点之一。
本文以建立微流控电泳芯片中的手性分离新方法为主要目的,研究了微流控电泳芯片中的几种手性分离方法。全文共分四章。
第一章综述了目前微流控电泳芯片手性分离方法的研究发展,包括毛细管电泳手性分离模式及应用于微流控芯片电泳中的手性分离模式;简述了微流控芯片的制备、进样、分离和检测。
第二章在普通化学实验室实现了PDMS全程制作工艺。通过在线聚合方式在PDMS微流控芯片中化学键连接了聚丙稀酰胺(PAA)凝胶,制备得到了具有很高分离效率的凝胶柱芯片,把烯丙基-β-环糊精(allyl-β-CD)作为PAA凝胶制备中的交联剂和功能性手性识别剂直接键合到凝胶柱中。实现了PAA凝胶柱和PDMS的稳固化学键合,解决了PDMS微流控芯片疏水性强的问题。并用此微流控芯片对五种丹酰化氨基酸混合物实现了快速、高效分离及丹酰化苏氨酸的手性分离。
第三章制备了一种键合γ-环糊精的手性分离微流控芯片。通过在线聚合方式在PDMS微流控芯片中化学键连了聚丙稀酰胺(PAA)凝胶,特别对较大分子具有很好手性识别能力。考察了该微流控手性识别芯片对六FITC标记的丹酰化氨基酸的快速、高效手性分离。充分证实了γ-环糊精键连的PAA凝胶凝胶柱PDMS微流控芯片的高效手性分离能力。
第四章制备了一种牛血清白蛋白(BSA)一纳米金结合物作为固定相的手性分离微流控芯片。通过巯基和其它静电作用力稳定地在金纳米颗粒上负载了牛血清白蛋白(BSA)作为手性识别剂,制得相应的玻璃手性分离微流控芯片。用原子力显微镜对玻璃微通道的修饰过程进行了表征;用FITC标记的麻黄碱和伪麻黄碱作为检验电解质,证实了该微流控芯片较强的手性分离能力。