目的本研究通过回顾性病例分析探寻陈旧红细胞输注对体外循环冠脉搭桥患者术后结局的影响，并在此基础上，分别从细胞水平、亚细胞水平和代谢组学角度探索不同保存期悬浮红细胞上清对心肌细胞的作用及其发生机制，为进一步明确陈旧红细胞功能变化、规避陈旧红细胞输注导致的不良后果、提高临床红细胞治疗效果提供实验依据。方法1.将住院期间术后常见严重并发症作为主要观察指标并定义为“恶性结局”，按“恶性结局”发生与否将221名体外循环冠脉搭桥患者分为实验组和对照组，巢式病例对照研究方法将样本按照性别、年龄和体外循环时间以1：3比例匹配，条件logistic回归方法分析红细胞保存时间是否是影响体外循环冠脉搭桥患者预后的主要因素。2.采集6人份18-20岁男性合格献血员血液标本2U，制成悬浮红细胞，分别在库存0、7、14、21、28和35d时离心留取上清，将不同保存期悬浮红细胞上清按大剂量输血比例（10U）与SD乳鼠心肌细胞共培养，分别在作用0.5h、3h、6h和24h观察心肌细胞搏动性。3.模拟陈旧悬浮红细胞上清中钾离子浓度并探讨其对心肌细胞搏动性影响；不同保存期悬浮红细胞上清与心肌细胞作用24h时，检测心肌细胞胞内活性氧水平，并对其进行细胞骨架和线粒体膜电位染色；核磁共振技术检测不同保存期悬浮红细胞上清的代谢组学改变。结果1.平均红细胞保存时间与“恶性结局”的发生有显著相关性，平均红细胞保存时间每增加一天，发生“恶性结局”的风险就增加1.2倍(95%CI:1.032-1.401,p=0.018)。2.当红细胞上清与心肌细胞作用3h时，保存14天或更陈旧的红细胞上清可导致部分心肌细胞停搏，其中14天组停搏率达27.8％，35天组44.4％；反应时间延长到6h时，7天及以后的红细胞上清均导致心肌细胞不同程度停止搏动，其差别均有统计学意义（p<0.001）。3.模拟陈旧红细胞钾离子浓度并未造成心肌细胞停搏，陈旧悬浮红细胞上清作用的心肌细胞其ROS表达、细胞骨架和线粒体膜电位变化较新鲜红细胞组均未发现显著差别。核磁共振代谢组学研究发现，随悬浮红细胞保存时间的延长，样本中缬氨酸/亮氨酸/异亮氨酸、乳酸和丙氨酸含量升高，而枸橼酸和糖类含量显著下降，且变化具有统计学意义（p<0.05）。结论1.陈旧红细胞输注可显著影响体外循环冠脉搭桥患者短期预后，此类患者围术期应尽量输注新鲜红细胞。2.保存期大于14天的悬浮红细胞上清可不同程度导致体外SD大鼠心肌细胞停搏。3.本研究可排除高浓度钾离子、氧化应激损伤、细胞骨架和线粒体损伤途径作为本实验中陈旧悬浮红细胞上清导致心肌细胞停搏的独立影响因素，其机制有待进一步探索。