小麦种子休眠基因TaSdr与籽粒大小基因TaGS的克隆和功能标记发掘

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wzq8013
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小麦穗发芽在我国普遍发生,长江中下游冬麦区和西南冬麦区尤为严重,黄淮冬麦区和北部冬麦区穗发芽也呈加重趋势,抗穗发芽已成为重要的育种目标。小麦高产育种中,千粒重是重要目标性状之一。本研究以水稻控制籽粒休眠和籽粒大小的基因OsSdr4和OsGS3为候选基因,克隆小麦同源基因TaSdr和TaGS,分析其等位变异,发掘验证相应功能标记,主要结果如下:1.以水稻OsSdr4基因为源序列,同源克隆了小麦种子休眠基因TaSdr,该基因位于小麦第2同源群,将其分别命名为TaSdr-A1、TaSdr-B1和TaSdr-Dl,其编码区(CDS)长度分别为993bp、981bp和987bp。,小麦TaSdr基因的开放读码框略小于水稻OsSdr4基因,但与OsSdr4基因序列有较高的相似性(-75%)。小麦TaSdr基因没有内含子,与水稻OsSdr4基因一致。通过对不同小麦品种TaSdr基因序列进行多态性分析,发现TaSdr-A1基因在643bp位点存在1个SNP(G/A),其编码的氨基酸由亮氨酸(Leu)突变为脯氨酸(Pro),将G碱基类型命名为TaSdr-Ala (GenBank登录号:KF021988),将A碱基类型命名为TaSdr-Alb (GenBank登录号:KF021989)。不同品种TaSdr-B1基因在CDS区没有序列差异,而在起始密码子上游-11位点存在1个SNP (A/G),A碱基类型被命名为TaSdr-Bla (GenBank登录号:KF021990),G碱基类型被命名为TaSdr-Blb (GenBank登录号:KF021991)。不同小麦品种TaSdr-D1基因(GenBank登录号:KF0211992)没有序列多态性。2.基于TaSdr-Al基因643位点的SNP,开发了CAPS标记Sdr2A, TaSdr-Ala基因型产生1140bp特征条带,TaSdr-Alb基因型产生525/650bp特征条带。用此标记检测44份中国小麦品种,不同TaSdr-Al等位基因间发芽指数(GI)平均值差异不显著。根据TaSdr-Bl基因-11位点的SNP,开发了CAPS标记Sdr2B, TaSdr-Bla基因型产生650bp条带,TaSdr-Blb基因型产生766bp条带。利用洋小麦/中优9507RIL群体,将TaSdr-Bl基因定位于小麦2BS染色体着丝粒附近,位于SSR位点Xwmc477和Xbarc55之间,与Xwmc477紧密连锁,遗传距离为3.2cM。在Sdr2B (TaSdr-Bl)位点检测到1个与其共分离的QTL,北京、石家庄和两地点平均值的LOD值分别为3.52、2.87和3.95,可解释表型变异的7.8%、6.4%和8.7%。利用两组中国小麦品种对TaSdr-Bl基因进行分析,TaSdr-Blb基因型GI值显著高于TaSdr-Bla基因型。用两个与小麦籽粒休眠相关基因TaSdr-Bl与TaVp-1进行联合检测,可以有效提高检测的准确性。3.小麦TaSdr-Bl等位基因在不同国家的分布频率存在较大差异,日本品种TaSdr-Bla分布频率最高(62.5%),而德国、罗马尼亚、俄罗斯、乌克兰和塞尔维亚的材料中没有TaSdr-Bla基因型。TaSdr-Bla基因型在中国品种中的频率为37.4%,长江中下游冬麦区比例最高(48.9%),西南春麦区次之(41.9%),新疆冬春麦区最低(14.8%)。4.以水稻OsGS3基因为源序列,同源克隆了小麦7DS染色体上的TaGS基因,将其命名为TaGS-Dl,该基因含有3个内含子和4个外显子,cDNA序列总长为255bp,编码85个氨基酸。小麦TaGS-D1基因cDNA序列和编码的氨基酸序列与水稻OsGS3基因有较高的相似性,分别为75.5%和72.2%。不同小麦品种TaGS-D1基因编码区没有序列差异,但在第1内含子区存在1个SNP,第2内含子区存在30个SNP、1个3bp的InDel和1个40bp的InDel,将有40bp插入序列的基因型命名为TaGS-Dla(GenBank登录号:KF687956),另一序列命名为TaGS-Dlb(GenBank登录号:KF687957)。5.根据TaGS-D1基因第2内含子中40bp的InDel,开发了1个共显性标记GS7D,用于检测TaGS-D1的两个等位基因,TaGS-D1a基因型扩增产生562bp条带,TaGS-D1b基因型扩增产生522bp条带。利用豆麦/石4185RIL群体,将TaGS-D1基因定位于小麦7DS染色体末端,与SSR位点Xbarc184的遗传距离为7.9cM。在GS7D (TaGS-D1)位点检测到1个与千粒重河粒长相关的QTL,在北京、石家庄和两地点平均值3个环境下,最高可解释千粒重表型变异的14.6%,解释粒长表型变异的6.8%。应用GS7D标记检测了175份中国小麦品种,TaGS-D1a基因型千粒重显著高于TaGS-D1b基因型。用与小麦粒重相关的两个基因TaGS-D1和TaCwi-Al进行联合检测,可以显著提高检测的准确性。6.用GS7D对19个国家的1061份品种进行检测,塞尔维亚、日本、澳大利亚和加拿大小麦中TaGS-D1a基因型分布频率较高,分别为90.0%、87.5%、87.1%和83.3%,德国和挪威TaGS-D1a基因型频率最低,仅为8.1%和4.5%。中国小麦品种TaGS-D1a基因型频率为80.0%,其中东北春麦区最高(96.7%),北部冬麦区次之(87.7%),西北春麦区最低(64.3%)。本研究首次报导了TaSdr和TaGS位点的等位变异,发掘并验证的两个基因特异性标记Sdr2B和GS7D对小麦分子育种有重要应用价值。
其他文献
水稻作为世界上最重要的农作物之一,其生长和产量受各种不同胁迫环境所局限,而盐害是其中最主要的灾害。高盐胁迫能刺激植株细胞中游离钙离子瞬时的上升,这种钙信号将被级联
水资源短缺与过量施氮造成的环境污染是近年来制约甘肃河西绿洲农业发展的主要因素。2010-2011连续两年在甘肃河西绿洲灌区甘肃省农垦农业研究院试验基地布置大田试验,设计常
阿秒脉冲的出现为人类带来了一种拥有前所未有时间分辨率的超快探测工具,从而开启了阿秒科学的大门。短短几年内,利用阿秒脉冲在原子分子物理、纳米材料、凝聚态材料等学科已
在企业PDM中查询,引入模糊技术以使人机交互界面更具人性化和智能化,从而更加友好和方便本文对此进行了探讨并给出了具体方法,利用该技术可消除错误字符的干扰,简化操作提高选择速度
全麦粉比普通小麦粉有更高的营养价值,但全麦粉目前的生产技术并不能满足人们对全麦粉的需求。通过简述全麦粉的营养价值,主要就全麦粉的生产工艺和研究现状进行了综述,对制
<正>三七种植技术要求比较高,尤其是对三七进行施肥的技术要求高,既要满足三七生长生殖需要,又不能因施肥引起病害。故施肥技术是种植三七需要掌握的重点技术。1)三七的施肥
荣乌高速东起山东荣成西至内蒙古乌海市,全长1820km,是国家高速公路网规划的18条东西横线的主干道之一。荣乌高速棋盘井至乌海段总投资30亿元,线路长52.047km,于2014年10月开
在初中物理教学中,教师要树立生本理念,立足于学生的长远发展,采取有效的教学形式促进学生的物理思考,提升他们运用物理知识解决生活问题的能力。本文主要从合作、生活、实验
前列腺增生症(BPH)是一种老年性常见病,60岁以上男性43%患有阻塞性BPH,其生活质量受到严重影响.BPH的发病机理尚不清楚,本文通过对BPH患者血清睾酮(T)、雌激素(E2)以及它们比