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犬瘟热（Canine distemper, CD）是由犬瘟热病毒（Canine distemper virus, CDV）引起的一种食肉目动物的急性、高度接触性传染病，临床表现为双相热、结膜炎、急性鼻卡他、严重的胃肠炎和神经症状等，呈世界性分布。近年来，珍稀动物如大熊猫、伊比利亚猞猁和免疫犬发生CD的报道，证实和提示了CDV感染宿主范围在不断扩大和抗原性可能发生变异，这一现象引起了众多学者对CDV的未知感染宿主和生物学特性研究的关注。病毒分离和鉴定是当前流行CDV毒株生物学特性研究的基础，但CDV在Vero、MDCK等常用的细胞系上或不易适应，或不产生典型细胞病变（CPE），或传代几次后病毒丢失，分离率较低，影响和限制了对犬瘟热病毒野毒株的分离、生物学特性和致病机制的研究。因此，建立易于CDV培养增殖的细胞系，对开展CDV的深入研究和疫苗毒生产都具有重要的应用价值。信号淋巴细胞激活分子（Signalling Lymphocyte Activation Molecule, SLAM,也称为CD150）是CDV感染宿主的主要受体，本研究旨在建立以BHK-21细胞为亲本细胞，能稳定表达犬SLAM的细胞系，用于CDV分离和体外研究。研究克隆了不含信号肽的编码犬SLAM的基因片段，将其定向插入真核表达载体pDisplay，得到重组表达载体pDisplay/SLAM。将pDisplay/SLAM用脂质体法转染到BHK-21细胞，通过G418压力筛选并结合有限稀释法、细胞免疫荧光和RT-PCR筛选出稳定表达SLAM的阳性细胞，命名为BHK-21/SLAM。应用RT-PCR方法对BHK-21/SLAM细胞的第5、10、15和20代细胞mRNA检测结果显示，SLAM的编码基因在BHK-21/SLAM细胞中稳定转录；细胞免疫荧光检测结果显示第20代BHK-21/SLAM细胞中有SLAM蛋白稳定表达；Western Blot也证明了SLAM蛋白在BHK-21/SLAM细胞中获得了表达。BHK-21/SLAM和BHK-21细胞的形态无明显差异，但单位面积总细胞数比后者多。病毒培养增殖实验结果显示，CDV Snyder Hill参考株在BHK-21细胞上未出现细胞病变，而感染BHK-21/SLAM细胞后12h后即可出现细胞病变； CDV Snyder Hill参考株在BHK-21/SLAM细胞上培养（24h）后的TCID50为10-3.9/0.1ml；BHK-21/SLAM细胞上清中的CDV Snyder Hill株病毒核酸含量于24h达到最高值（107.9拷贝/μl），较相同时间BHK-21细胞上清中的核酸含量显著提高。病料分离株CDV-Z7可在BHK-21/SLAM细胞上产生典型CPE，而在BHK-21细胞上无CPE。本研究建立了稳定表达犬SLAM的细胞系BHK-21/SLAM，与BHK-21细胞相比较，受试病毒在该细胞上的增殖滴度更高，产生的CPE更明显。该细胞系有望为CDV的分离、生物学特性研究和疫苗毒生产发挥积极的作用。