论文部分内容阅读
本论文由三章组成。第一章综述了脂肪细胞及其与2型糖尿病关系的研究进展。第二章论述茜草提取物及其化合物降血糖作用研究。第三章论述益智叶的体外抗氧化、α-葡萄糖苷酶活性抑制作用,与益智叶对急性肝损伤小鼠的保肝作用,以及其对糖尿病小鼠的降血糖作用。第一章脂肪细胞及其与2型糖尿病的关系研究进展通过对脂肪细胞及2型糖尿病文献的搜集、整理及分类,综述脂肪细胞的分类及其作用,以及2型糖尿病中胰岛素抵抗与脂肪细胞因子的关系研究进展。第二章茜草提取物及其化合物降血糖作用研究体外建立脂肪细胞降糖模型,评价茜草提取物及其化合物体外降糖作用。体内试验采用的是由四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型,评价茜草提取物及其化合物对糖尿病小鼠空腹血糖值、肝糖原水平、血清中甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、丙二醛（MDA）含量、以及超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响,评价茜草提取物及其化合物降血糖作用。结果表明,在体外测定脂肪细胞对葡萄糖的摄取能力试验中,茜素（AZ）和大叶茜草素（MU）均能有效的促进大鼠附睾脂肪细胞对葡萄糖的摄取,且在质量浓度为1.6 mg/m L时,脂肪细胞对葡萄糖的摄取率均最大,分别为64.53±1.24%、47.67±3.91%;体内试验中,与糖尿病模型组小鼠相比,茜草乙酸乙酯提取物（RCEA）、石油醚提取物（RCPE）及分别从这两个部位分离得到的化合物茜素（AZ）、大叶茜草素（MU）均能显著的降低空腹血糖、餐后血糖、血清TC、TG、MDA含量,升高SOD活性和肝糖原含量,显著性比较具有统计学意义（P<0.05）,且呈现浓度依赖性。结论:RCEA、RCPE、AZ及MU均能有效的降低血糖水平,而AZ和MU分别是从两个提取物中分离纯化得到,因此可以推断AZ和MU分别是茜草乙酸乙酯部位和石油醚部位的活性成分,可进行进一步的研究开发。分别采用DPPH法、ABTS法、FRAP法、保护红细胞抗氧化损伤以及TBA法测定小鼠肝肾组织MDA的生成等5种体外抗氧化方法测定益智叶体外的抗氧化活性。发现在清除DPPH自由基、ABTS自由基和总抗氧化能力/Fe3+还原能力的测定方法中,益智叶正丁醇提取物（AOLBU）效果（DPPH IC50=24.45±4.79μg/m L、ABTS IC50=3.19±0.17μg/μL、Trolox当量=2212.89±230.98μmol/g）要好于其乙酸乙酯提取物（AOLEA）（DPPH IC50=34.25±1.27μg/m L、ABTS IC50=5.22±0.36μg/μL、Trolox当量=955.81±61.20μmol/g）;在对红细胞膜保护的测定中,在质量浓度为107.84μg/m L时AOLEA和AOLBU的小鼠红细胞溶血率分别为18.21±0.71%、28.76±2.65%,接近阴性对照（11.65±0.45%）;在对肝肾组织细胞膜的保护作用的测定方法中,AOLEA和AOLBU对肝组织中MDA的抑制率分别为115.26±2.57%、108.17±2.98%,均高于阴性对照（84.15±4.83%）;AOLEA和AOLBU对肾组织中MDA的抑制率分别为106.50±4.77%、112.74±11.75%,也均高于阴性对照（71.67±3.27%）。因此益智叶提取物AOLBU和AOLEA均具有较好的抗氧化活性。体外α-葡萄糖苷酶活性抑制研究发现,除益智叶石油醚提取物（AOLPE）外,其乙酸乙酯部位（AOLEA）、正丁醇部位（AOLBU）均具有较好的α-葡萄糖苷酶活性抑制作用（IC50=55.00±0.23μg/m L和345.70±2.51μg/m L）。体内保肝实验中,采用腹腔注射四氯化碳（CCL4）油溶液诱导急性肝损伤模型,研究益智叶提取物的保肝作用。结果表明,AOLEA能显著的降低GOT活力（P<0.001）和MDA含量（P<0.001）,并显著升高SOD活力（P<0.001）;AOLBU能显著降低GPT和GOT的活力（P<0.01,P<0.01）,并且能够降低肝组织中MDA含量（P<0.01,P<0.01,P<0.001）,且同时显著升高SOD活力（P<0.05）。因此AOLEA和AOLBU具有较好的保肝作用,且抗氧化机制可能是其保肝作用的机制之一。动物降血糖模型研究中,发现AOLEA（800 mg/kg b.w.、200 mg/kg b.w.）、AOLBU（800 mg/kg b.w.）均能一定程度的降低空腹血糖值（P<0.01,P<0.05,P<0.01）,且疗效与阳性对照药物阿卡波糖组疗效相当（P>0.05）,且这3组能有效缓解糖尿病小鼠并发症,机制可能是通过降低血清中TC（P<0.05,P<0.01,P<0.01）、TG（P<0.01,P<0.05,P<0.01）的含量,调节四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠体内脂质代谢紊乱;以及降低血清中MDA的含量（P<0.001,P<0.001,P<0.001）,升高SOD活力（P<0.001,P<0.01,P<0.001）,增强机体抗氧化能力,以及增加肝糖原含量（P<0.01,P<0.001,P<0.01）,从而缓解糖尿第三章益智叶保肝与降血糖作用研究病并发症。结合体外α-葡萄糖苷酶活性抑制作用结果表明,AOLEA和AOLBU具有降血糖作用。