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目的:(1)检测TRIP13在结直肠癌组织中的表达情况,研究TRIP13与结直肠癌患者预后的关系;(2)研究TRIP13对结直肠癌细胞生物学功能的影响;(3)研究TRIP13在结直肠癌中发挥作用的具体机制。方法:(1)应用Western Blotting和免疫组化检测TRIP13在结直肠癌组织中表达,分析TRIP13表达水平与临床病理因素以及患者预后间的关系。(2)在结直肠癌细胞株中敲低和过表达TRIP13,进行MTT、平板克隆形成、Transwell侵袭迁移实验,检测干预TRIP13表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。应用稳定敲低和过表达TRIP13的结直肠癌细胞进行裸鼠皮下成瘤实验,比较TRIP13上调、下调对结直肠癌成瘤能力的影响。(3)应用Western Blotting检测TRIP13敲低和过表达对E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、snail表达的影响,以明确TRIP13是否参与结直肠癌细胞侵袭转移过程中的EMT。应用免疫共沉淀和蛋白质谱分析鉴定出TRIP13作用相互作用蛋白,在TRIP13过表达的细胞中敲低该相互作用蛋白,应用Western Blotting检测E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、snail表达情况。在肠癌组织中检测靶蛋白的表达情况,与TRIP13进行相关性分析,以明确TRIP13与该相互作用蛋白的作用关系。结果:(1)TRIP13在结直肠癌组织中的表达水平明显高于正常肠上皮组织,并且TRIP13与肿瘤分期(pTNM)、CEA、CA19-9密切相关,TRIP13高表达的患者预后更差。(2)敲低TRIP13能显著抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,而过表达TRIP13则能明显促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。裸鼠体内成瘤实验也证实了敲低TRIP13后细胞的成瘤能力减弱,而过表达TRIP13后细胞的成瘤能力增强。(3)敲低TRIP13后E-cadherin表达上调,N-cadherin、β-catenin、snail表达下调;而过表达TRIP13后E-cadherin表达下调,N-cadherin、β-catenin、snail表达上调。质谱结果显示TRIP13与YWHAZ相互作用;敲低YWHAZ可以抵消过表达TRIP13抑制E-cadherin表达以及促进N-cadherin、β-catenin、snail表达的作用。Spearman相关性分析显示YWHAZ与TRIP13呈正相关关系。结论:(1)TRIP13在结直肠癌组织中高表达,TRIP13可以作为结直肠癌预后的独立危险因素。(2)TRIP13能促进结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移能力和裸鼠成瘤能力。(3)TRIP13通过作用于YWHAZ调控EMT,进而促进结直肠癌侵袭迁移。