论文部分内容阅读
红芪(Radix Hedysari)也称为独根,为豆科植物多序岩黄芪Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.的干燥根,是甘肃道地药材。经多年研究发现,红芪具有提高免疫、抗肿瘤、抗氧化和抗肝纤维化等多种多样的生物学活性。此外,实验室前期研究表明红芪防治CCl4诱导小鼠肝损伤疗效显著。目前,国内外大多是对中药单体化合物、单味药或单个复方进行防治肝损伤的研究,但是将多个复方同时进行筛选比较研究较少,并且对多个以红芪为主药的复方筛方研究及拆方研究尚属空白。本论文开展的具体内容如下:第一部分:筛选防治肝损伤的红芪复方。皮下注射四氯化碳(CCl4)-花生油致小鼠肝损伤,分别给予4个红芪复方(20 g原药材·kg-1,每日1次)灌胃,7周后测定血清中谷丙转氨酶(ALT)活性、谷草转氨酶(AST)活性;测定肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。结果显示,CCl4所致小鼠肝损伤效果明显;4个红芪复方对CCl4所致小鼠肝损伤药效显著,但药效活性存在差异,其中红芪复方三的效果最佳。第二部分:对筛选出的红芪复方三通过撤药拆方的方法进行精简方剂的拆方研究。从红芪中药复方君、臣、佐、使配伍关系出发,以君药红芪为核心,通过撤药拆方的方法,将其它四味中药各去掉一味作为四个拆方组。通过CCl4-花生油皮下注射致小鼠肝损伤,同时给予红芪复方三全方及四个红芪复方拆方(20 g原药材·kg-1,每日1次)灌胃,7周后测定血清中谷丙转氨酶(ALT)活性、谷草转氨酶(AST)活性、及白球蛋白比值(A/G);测定肝组织匀浆中总超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。结果表明,CCl4所致小鼠肝损伤效果明显;红芪复方三全方和四个红芪复方拆方对CCl4所致小鼠肝损伤药效显著,但药效活性存在差异,其中红芪复方拆方一效果最佳。第三部分:建立了HPLC-DAD法分析红芪复方三全方和各拆方化学成分的分析方法。对红芪复方三全方和各拆方的主要色谱峰进行峰归属和HPLC图谱成分差异比较。色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%乙酸水溶液,梯度洗脱,检测波长330 nm,柱温30℃。结果显示,用HPLC-DAD技术能够对红芪复方三全方和各拆方通过峰归属进行定性鉴别和成分差异的比较。