小鼠巨细胞病毒宫内感染对胎仔生长发育的影响

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【目的】①建立小鼠巨细胞病毒宫内感染实验模型,观察母鼠妊娠结局及对MCMV宫内感染胎仔生长发育的影响;②研究MCMV宫内感染胎仔主要组织脏器如肝、脑、肺病理损害规律、探讨其致病机制。【方法】①建立MCMV宫内感染实验动物模型:MCMV Smith株经小鼠胚肺细胞增殖传毒后,用ELISA筛选无MCMV感染史性成熟期小鼠,雌雄同笼受孕随机分组。⑴感染组:在孕龄12.5d时,母鼠在无菌条件下经开腹手术胎盘显微注射MCMV悬液;⑵对照组:在同一孕龄通过胎盘显微注射等体积3%FCS DMEM,待其发展到孕龄18.5d时处死母鼠,并观察母鼠、胎仔生长发育状况;②PCR及RT-PCR法检测MCMV胎盘感染率、胎仔感染率及胎仔重要器官组织感染率;③光学显微镜和透射电镜观察感染胎盘组织和胎仔的主要组织脏器组织学改变。【结果】①感染组与对照组胎盘感染率分别为63.27%(31/49)和0.00%(0/45),P<0.001;胎仔感染率分别为32.65%(16/49)和0.00%(0/45),P<0.001;死胎率分别为34.69%(17/49)和31.11%(14/45),χ2=0.136,P>0.05;畸胎率分别为22.45%(11/49)和0.00%(0/45),P<0.001;胎仔异常率分别为57.14%(28/49)和31.11%(14/45),P=0.011;胎仔平均重量分别为1.053±0.208(g)与1.297±0.071(g),P<0.01;胎仔平均身长分别为25.690±2.440(mm)和28.160±1.720(mm),P<0.01;胎仔平均尾长分别为10.090±0.990(mm)和10.580±0.720(mm),P=0.03;胎仔平均头围分别为22.310±3.200(mm)和25.390±1.170(mm),P<0.01;胎仔平均脑重分别为0.055±0.011(g)与0.069±0.001(g),P<0.01;胎仔平均脑体比值分别为0.052±0.002与0.069±0.087,P=0.27;②感染胎盘及胎仔肝、肺、脑出现非特异性炎症改变,出现血管扩张、充血,淋巴细胞、单核细胞浸润。透射电镜下感染组胎鼠的肝、脑、肺出现脏器细胞胞体肿胀、细胞浆透透明状改变,胞核皱缩,染色质凝聚、边集,线粒体肿胀、嵴消失、部分成空泡状,高尔基体及内质网扩张成管状、泡状等相应的病理损害;③胎盘接种病毒第2~7d,胎盘及胎仔均检出MCMV DNA和MCMV mRNA,且MCMV mRNA表达水平逐日提高。【结论】①经胎盘接种MCMV可导致胎盘和胎仔感染。感染出现于接种MCMV后第2~7d,且MCMV负荷量逐日提高。感染脏器均呈现非特异性炎性变;②胎盘接种病毒所导致的胎盘感染和子代感染,可导致小头畸形等畸胎,并影响胎仔体格发育和脑部发育。
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