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研究背景:脓毒症在严重创伤、感染和大手术病人中非常常见,治疗困难,死亡率高。免疫抑制和继发感染是目前脓毒症患者主要死亡原因,其发生机制尚不清楚,缺乏有效治疗措施。尼克酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)是一种多功能分子,它是一种促炎细胞因子,同时具有酶活性,是NAD补救生物合成的限速酶,调节多种细胞的能量代谢、分化与死亡等生命活动。已有研究显示,NAMPT可促进脓毒症炎症反应和器官功能损害,但它在脓毒症免疫抑制发生中的作用尚未见报道。研究目的:(1)探讨NAMPT在脓毒症免疫抑制发生中的作用;(2)了解NAMPT抑制剂FK866对脓毒症小鼠死亡率和T细胞免疫反应的影响。研究方法:(1)建立CLP(盲肠结扎穿孔)脓毒症模型。(2)实验动物分组:A:实验组:NAMPT抑制剂FK866治疗组;B:对照组:CLP+FK866溶媒组;C:假手术组。(3)CLP小鼠生存率监测:各组动物(n=13~15)在手术后观察10天,记录小鼠生存情况。(4)ELISA检测各小鼠血清细胞因子水平。(5)流式细胞术检测小鼠CD4+T细胞增殖能力和凋亡。(6)迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)在整体水平检测小鼠T细胞功能。(7)免疫组织化学方法检测小鼠脾脏及肝脏一氧化氮合成酶(i NOS)水平。(8)流式细胞术(FCM)检测MDSC及Treg细胞比例。研究结果:(1)NAMPT抑制剂FK866可显著提高严重脓毒症小鼠鼠的生存率(p<0.05)。(2)同时,FK866可显著降低小鼠血循环中细菌数量,提示FK866可提高CLP小鼠对感染的抵抗力。(3)CLP后1d和3d,FK866治疗组小鼠血清中细胞因子水平均较CLP组为低。CLP后7d,FK866治疗组小鼠血清TNF-α和TGF-β仍较CLP组低(p<0.05),但IFN-γ、IL-6、IL-10和PGE2两组间差异无统计学意义(p>0.05)。(4)FK866治疗组CLP小鼠CD4+T细胞增殖较对照组(CLP+vehicle组)显著增加(p<0.05),凋亡则显著减少(p<0.05)。(5)DTH实验显示,FK866治疗组小鼠T细胞功能较对照组显著提高(p<0.05)。(6)免疫组化检测显示,FK866治疗组CLP小鼠较对照组(CLP+vehicle组)肝脏和脾脏组织中i NOS表达均显著下调。(7)CLP后3d和7d,FK866治疗组小鼠脾脏、骨髓和外周血中MDSC比例均较对照组(CLP+vehicle)显著降低。但在CLP后1d,两组差异无显著意义(p>0.05)。结论:NAMPT在CLP小鼠免疫抑制的发生中起重要作用。NAMPT抑制剂可提高CLP小鼠生存率,部分修复CLP小鼠T细胞免疫功能。NAMPT可能作为脓毒症免疫抑制的有效治疗靶点。