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小鹅瘟是由细小病毒科、依赖病毒属中的鹅细小病毒引起的一种高度接触性和败血性传染病,主要侵害4～20日龄内的雏鹅和雏番鸭,引起急性肠炎及肝脏、肾脏、心脏等实质脏器败血性病变,尤其以小肠部位的纤维性、栓塞性病变为主要特征,发病率和死亡率可高达90%以上。目前,此病每年都有不同程度的流行,是养鹅及番鸭地区最主要的传染病之一,造成严重的经济损失。因该病主要感染雏鹅和雏番鸭,所以,该病的早期诊断显得极为重要。本试验用GPV南京分离株(NJ株)接种非免疫鹅胚,将收获的病毒尿囊液与等量氯仿混合,除去杂蛋白,加入氯化钠使其浓度达到2.2%,用终浓度6%PEG-6000将绝大部分病毒沉降下来,通过蔗糖密度梯度超速离心对病毒进行纯化。经PCR检测及电镜观察,发现病毒主要分布在35%～50%蔗糖浓度之间,病毒的蛋白含量为216μg/ml,SDS-PAGE电泳分析,证明病毒的纯度达到90%以上,达到实验要求。将提纯浓缩后的小鹅瘟病毒用甲醛灭活,免疫6周龄BALB/c雌性小鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,获得3株能稳定分泌抗小鹅瘟病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1E12/2H11和3F1。腹水效价分别为1：32000、1：80000和1：16000;间接免疫荧光试验证明该三株单抗均有良好的特异性；western blot证明这三株单抗均针对鹅细小病毒结构蛋白VP3。选取效价高的单克隆抗体2H11进行纯化,制备金标抗体玻璃纤维素膜；将纯化的兔抗小鹅瘟多抗固定于硝酸纤维素膜(NC)上作为捕获抗体,制作成双抗夹心法GPV胶体金免疫层析试纸条。用该试纸条可特异性检测小鹅瘟病毒,在10～15min内可得到检测结果,敏感度为104.1GELD50/0.2ml。该试纸条特异性高,重复性好,可用于GP的临床快速诊断。