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目的：建立大鼠心肌缺血再灌注损伤(IRI)模型,观察加味丹参饮(JWDSY)含药血清体外诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对IRI大鼠的心脏保护作用,探讨其对心肌IRI大鼠血管新生的动态影响和作用机制。方法：实验一：采用全骨髓贴壁法培养大鼠BMSCs,并进行传代、扩增,对细胞形态学和生长特性进行观察,绘制生长曲线,通过流式细胞术对细胞表面抗原CD34、CD45、CD90进行表型鉴定。实验二：采用MTT法检测不同浓度加味丹参饮含药血清对BMSCs的毒性作用及增殖的影响。将全骨髓贴壁法培养的大鼠BMSCs分别加入加味丹参饮含药血清与空白血清,体外诱导分化3d。建立心肌IRI大鼠模型,随机分为四组：假手术组、模型组、空白血清诱导的BMSCs组和加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs组。采用心肌内直接注射移植的方法,在动物造模成功后立即将诱导后的移植细胞分3点注射到梗死边缘区的心肌内,模型组和假手术组注射等量的L-DMEM。肉眼观察结扎部位的大体表现,分别于移植后3d、7d、14d三个时相点,TTC染色法测定大鼠左室心肌梗死面积的变化,HE染色光学显微镜观察心肌组织一般形态学改变,观察缺血区病理改变；应用全自动生化分析仪测定大鼠心肌酶CK、CK-MB水平；免疫组织化学染色法检测各组梗死部位边缘区血管内皮细胞特异性表面标志VⅢ因子和CD34的表达,计算和比较心肌微血管密度(MVD),评价其心脏保护和血管新生作用。实验三：诱导后的BMSCs移植方法同实验二。分别于移植后3d、7d、14d三个时相点,免疫组织化学染色法检测梗死心肌边缘区VEGF、 Ang-1、PDGF-β的蛋白表达,放射免疫方法检测血清IGF-1水平,Real-Time PCR法检测梗死边缘区VEGFmRNA、Ang-1mRNA的表达；评价加味丹参饮含药血清体外诱导的BMSCs心肌内移植促血管新生能力,探讨各种血管生长因子表达的变化与血管新生间的关系。结果：实验一：经流式细胞术鉴定,通过全骨髓贴壁法培养的BMSCs贴壁生长,传代3次后,细胞形态为较均匀一致的纺锤形,并呈平行样或漩涡样生长；纯度较高,细胞表面抗原CD90阳性细胞达到95%以上,CD34和CD45阳性细胞小于5%,符合实验要求。实验二：MTT结果显示,20%的加味丹参饮含药血清为诱导BMSCs的最佳工作浓度。大鼠结扎后ST段、T波异常增高,再灌注后ST段、T波快速回落,出现病理性Q波,提示IRI大鼠造模成功。BMSCs移植后不同时相点观察,与假手术组比较,模型组一般情况较差,心脏体积明显增大,血清心肌酶CK、CK-MB显著升高；BMSCs组治疗后大鼠一般情况有所改善,心脏外形、体积接近假手术组,心肌梗死面积缩小,含药血清组比空白血清组表现更为明显(P<0.05)；与模型组比较,加味丹参饮含药血清组、空白血清组的大鼠心肌酶CK、CK-MB水平均有所改善,而加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs组改善更明显；加味丹参饮含药血清和空白血清诱导的BMSCs组梗死心肌边缘区的微血管密度高于模型组(P<0.05)和假手术组(P<0.05)；与空白血清诱导的BMSCs组相比,加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs组增高更明显(P<0.05)。实验三：免疫组织化学染色法测定IRI大鼠梗死心肌边缘区的VEGF、Ang-1、PDGF-β蛋白表达的10D,放免法测定IGF-1水平,发现模型组上述生长因子的表达比假手术组明显增强(P<0.05),可以认为是机体对组织缺血缺氧的代偿机制导致,证明造模成功；加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs组、空白血清诱导的BMSCs组的表达水平明显高于模型组(P<0.05),加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs组升高更为显著(P<0.05),并普遍存在持续增高的趋势(P<0.05)。Real-TimePCR检测各组Ang-1mRNA的表达,发现各BMSCs组心脏组织在移植后3d、7d、14d均有VEGFmRNA、Ang-1mRNA表达,假手术组和模型组表达微弱；空白血清诱导的BMSCs组和含药血清诱导的BMSCs组的VEGFmRNA、 Ang-1mRNA表达高峰均在再灌注7d(P<0.05),以后逐渐减弱。加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs组的VEGFmRNA、Ang-1mRNA表达明显强于同时相点的空白血清诱导的BMSCs组(P<0.05)。各生长因子的高表达与反映新生血管强度的微血管密度(MVD)显示了一定的相关性。结论：1、全骨髓贴壁法可以培养出纯度较高、活性较好的BMSCs。2、加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs移植能改善心肌IRI大鼠的心功能,减小梗死面积,增加缺血区微血管密度,降低血清心肌酶CK、 CK-MB,比空白血清诱导的BMSCs移植改善更显著。3、加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs移植可以明显促进梗死心肌边缘区的血管新生,其作用可能与持续稳定上调缺血心肌局部VEGF、Ang-1、 PDGF-β蛋白表达、血清IGF-1水平及VEGFmRNA、 Ang-1mRNA的表达有关,效果优于空白血清诱导的BMSCs移植。加味丹参饮体外诱导对BMSCs移植促心肌血管新生具有协同和促进作用。