Gemini表面活性剂修饰量子点的合成及在蛋白质检测中的应用

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半导体纳米微粒尺寸介于分子与体材料之间,由于电子和空穴在三维方向均受限,量子效应十分明显,所以也称其为量子点。半导体纳米微粒具有量子尺寸效应、介电限域效应、表面效应、宏观量子隧道效应,因而具有优异的光学性质、光电催化特性和光电转换特性。由于量子点表面有大量不饱和的悬键,即表面缺陷态,影响其荧光量子产率。通过无机包覆的方法可以有效的减少表面缺陷,改善量子点的性能。随着纳米微粒制备技术的不断提高,纳米微粒的生物医学应用研究已经开始起步。半导体量子点(QDs)具有独特的光学性质,近二十年来,其在化学、物理、生物、医学等方面的潜在应用已引起了广大科学工作者的极大关注。目前高质量的量子点生物相容性差,若是要应用于生物大分子的检测,就必须进行表面功能化修饰使其溶于水。本论文在量子点的合成、修饰及初步应用等方面作了系统研究,主要内容包括:一、我们使用了荧光猝灭光谱和三维荧光光谱(3D)对阳离子Gemini表面活性剂(G14-6-14)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的机理进行了研究。根据荧光猝灭法的Stern-Volmer猝灭常数Ksv,并得到了相应的热力学参数△H,△G和AS。结果表明,主要BSA和表面活性剂之间相互作用力主要是疏水作用力。实验和结合位点的计算结果表明,G14-6-14可插入BSA的Site Ⅱ(ⅢA子域)。同步荧光光谱和三维荧光光谱法对。G14-6-14与BSA相互作用进行研究,结果表明,BSA的构象发生了变化,由于G14-6-14存在,BSA中色氨酸的微环境发生了变化。本文研究了BSA和G14-6-14之间相互作用的机理,为分子设计和工业研究提供了模型。二、用表面活性剂作为小分子,修饰纳米荧光材料,并将修饰后的量子点作为探针,对蛋白质的荧光猝灭进行检测,从而得出相关结论。本实验主要应用荧光光谱法研究了经表面活性剂修饰的CdTe-G14-3-14纳米荧光探针对于牛血清白蛋白(BSA)的检测。在固定激发波长350nm,室温下扫描500-680nm的发射光谱,得出蛋白质的荧光猝灭谱图。结果表明随着CdTe-G14-3-14浓度不断增大,BSA会发生猝灭现象,而荧光强度也会随着BSA浓度的增大而加强,产生此现象的原因是因为CdTe-G14-3-14与蛋白质结合后的体系结构的改变。另外,本实验还研究了在有CdTe-G14-3-14作为荧光探针时各种干扰粒子对蛋白质荧光猝灭的影响,并检测各种干扰例子的浓度。最后结合实际样品,检测了在有荧光探针的条件下,实际样品中蛋白质的检出限是:0.18μgL-三、在水相中,以巯基丙酸(MPA)为稳定剂制备了具有低毒荧光的ZnSe量子点,并对ZnSe量子点的合成条件进行了系统的研究,以TEM和XRD表征了ZnSe的形貌特征及晶体结构,研究了ZnSe的荧光光谱性质及紫外光谱性质。实验结果表明,ZnSe纳米粒子具有稳定性好、荧光强度高、以及ZnSe发射光谱可调性好等优点,通过用表面活性剂G16-6-16修饰ZnSe量子点,可以合成我们需要的纳米荧光材料,同时基于在蛋白质存在下ZnSe-G16-6-16的荧光强度明显降低这一现象,建立了一种以ZnSe-G16-6-16为荧光探针测定牛血清白蛋白的方法,在最佳条件下,工作曲线的线性范围为AF=0.41+0.081CBA(μgL-1),检测限为LOD=2.66μg L-1,并对样品进行了测定,结果令人满意。
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