多花筋骨草(Ajuga multiflora Bunge)细胞中含有植物源蜕皮激素—β-蜕皮甾酮(β-EC),β-EC可以调节昆虫的生长和发育,从而可以用来控制有害生物种群。本文以多花筋骨草为试验材料,运用细胞生物技术的方法,对其再生、快速繁殖及细胞悬浮培养体系进行了研究,建立了多花筋骨草高频再生体系,为无性繁殖与栽培、高产蜕皮甾酮的细胞系及其代谢调控机理等研究提供了技术支持。试验还研究了多花筋骨草细胞悬浮培养过程中营养基质消耗和次生代谢产物生成的动力学,以及采用不同的前体、诱导子、抑制剂对其进行处理,分别研究其对悬浮细胞和蜕皮甾酮合成规律的影响,结论如下:1、多花筋骨草再生体系的建立为了建立一个高效的多花筋骨草组织培养再生体系,以多花筋骨草嫩叶为外植体,进行了不同激素配比对愈伤组织诱导,不定芽增殖及根诱导的影响。结果表明:6-BA,KT及2,4-D组合能从外植体诱导出愈伤;6-BA和NAA组合可从外植体诱导出苗;6-BA可诱导不定芽及不定芽增殖;IBA可诱导根系发生。2、多花筋骨草细胞悬浮培养各营养消耗及动力学研究多花筋骨草细胞生长符合逻辑斯蒂方程曲线“S”型,生长周期为17d,分别为延滞期(1-3d)、对数生长期(3-1ld)、生长稳定期(11-15d)、衰亡期(15-17d);细胞培养过程中电导率与β-EC的积累呈负相关,可以通过电导率来监测细胞的生长高峰和β-EC含量积累高峰;培养液的pH值会随培养时间出现动态变化,但始终都在5～6之间浮动,培养结束时pH值为5.8;在整个培养过程中,细胞生长曲线与营养基质残留曲线有密切的相关性;本文主要从细胞生长、蔗糖消耗和蜕皮甾酮合成三方面初步建立了多花筋骨草细胞悬浮培养的动力学模型。3、前体、诱导子和代谢抑制剂对多花筋骨草细胞的影响1)继代次数会弱化多花筋骨草细胞生产蜕皮甾酮的能力。2)不同浓度的苯丙氨酸(L-PLA)几乎对悬浮细胞没有毒害,并能不同程度提高细胞活力,最高能将细胞活力提高到对照的2.2倍,还能少量提高细胞中β-EC的积累;低浓度甲瓦龙酸(MVA)也能提高细胞活力,同时也能大大提高细胞合成β-EC的能力,高浓度MAV对细胞有毒害,使细胞褐化死亡。3)NO作为诱导子,可以促进多花筋骨草的β-EC的合成代谢,并且这种诱导作用与诱导时间呈正相关;低浓度(≤0.5 mmol/L)的硝普钠(SNP)处理,β-EC产量基本上没有变化,当SNP处理浓度增加到1 mmol/L时,会有一个跳跃性的诱发作用。4)a-蒎烯和松油醇作为代谢抑制剂均能提高细胞合成β-EC的能力,但松油醇对于细胞的毒害作用过大,且最终还会抑制次生代谢产物β-EC的生成。5)试验结果发现:L-PLA的适宜浓度是0.2 mmol/L,MVA的适宜浓度为10mg/L,NO的供体SNP的最佳浓度是3mmol/L,松油醇的最佳浓度为1mmol/L,a-蒎烯的最适浓度为6mmol/L。