【摘 要】
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目的:考察溶剂对蛇葡萄素（Amp）溶解度的影响;研究注射用蛇葡萄素（Amp）、蛇葡萄素标准品（Amp标准品）及注射用蛇葡萄素钠盐（Amp-Na）对人膀胱癌UM-UC-3细胞增殖的抑制作用并比较三种药物作用强度的差别;初步探讨蛇葡萄素（Amp）对人膀胱癌UM-UC-3细胞的作用机制。方法:通过检测Amp溶液中是否存在丁达尔现象,确定其是否完全溶解;体外传代培养人膀胱癌UM-UC-3细胞,MTT比色法
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目的:考察溶剂对蛇葡萄素（Amp）溶解度的影响;研究注射用蛇葡萄素（Amp）、蛇葡萄素标准品（Amp标准品）及注射用蛇葡萄素钠盐（Amp-Na）对人膀胱癌UM-UC-3细胞增殖的抑制作用并比较三种药物作用强度的差别;初步探讨蛇葡萄素（Amp）对人膀胱癌UM-UC-3细胞的作用机制。方法:通过检测Amp溶液中是否存在丁达尔现象,确定其是否完全溶解;体外传代培养人膀胱癌UM-UC-3细胞,MTT比色法测定用Amp、Amp标准品及Amp-Na作用于细胞24、48及72 h对细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测Amp对UM-UC-3细胞各周期细胞百分数的影响;用激光共聚焦显微镜测定Amp对UM-UC-3细胞线粒体膜电位及细胞内Ca2+浓度的变化。结果:1.蛇葡萄素在PEG400、1,2-丙二醇各占15%,无水乙醇占70%的溶剂中溶解完全;Amp溶液最高浓度为50 mg/ml,可用5%葡萄糖注射液稀释。2.MTT 比色法检测结果显示:Amp作用于UM-UC-3细胞24、48及72 h的 IC50值分别为 57.13±8.52、45.50±6.98 及 40.35士1.62 μg/ml;Amp 标准品作用于 UM-UC-3 细胞 24、48 及 72 h 的 IC50 值分别为 40.37±3.67、35.64± 1.43 及33.31±1.21 μg/ml;Amp-Na 作用于 UM-UC-3 细胞 24、48 及 72 h 的 IC50值分别为51.60±4.62、47.27±3.98和 42.45±1.94μg/ml。3.流式细胞术检测结果显示:与阴性对照组相比,Amp能使UM-UC-3细胞周期阻滞于G0/G1期,并在G0/G1期前出现凋亡峰。4.激光共聚焦实验结果显示:Amp作用于UM-UC-3细胞48 h后,可引起线粒体膜电位显著降低,并呈现出明显的剂量依赖性;细胞Ca2+浓度显著升高,无剂量依赖性。结论:1.Amp溶剂中三种有机溶剂的最佳配比为:PEG400 15%、1,2-丙二醇15%、无水乙醇70%。2.Amp、Amp-Na及Amp标准品对人膀胱癌UM-UC-3细胞增殖均有显著的抑制作用,并呈现时间和浓度依赖性。3.Amp标准品的细胞毒作用强于Amp及Amp-Na,Amp与Amp-Na药效相似;上述实验结果提示Amp及Amp-Na冻干制剂在制备过程中,药物略有降解或生物活性稍有丧失。4.Amp体外可以通过线粒体途径诱导UM-UC-3细胞凋亡、使细胞周期阻滞于G0/G1期。
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