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目的:研究125Ⅰ粒子近距离照射联合应用低浓度5-FU持续作用对BEL-7402肝癌细胞周期和细胞凋亡的影响。
方法:1、流式细胞仪测定对细胞周期的影响。将处于指数生长期的BEL-7402细胞接种于24孔板,设置对照组、125Ⅰ粒子照射组、5-FU组和联合作用组4个实验组。对照组不进行任何干预,照射组采用表面活度33.3MBq的6711型125Ⅰ粒子,单粒置于24孔板培养孔内,5-FU组加入含终浓度为1mg/L的5-FU的培养液;联合治疗组同时加入125Ⅰ粒子和5-FU,作用24、48小时后收集细胞,应用流式细胞仪测定各组的细胞周期。
2、Annexin V-FITC/PI双染法测定对细胞凋亡的影响。将培养于24孔板内经过上述处理48小时后的BEL-7402细胞收集,应用Annexin V-FITC/PI标记细胞,应用流式细胞仪测定各组的凋亡指数。
结果:1、细胞培养24小时后,对照组BEL-7402细胞周期位于G0-G1、S、G2-M期的比率分别为(54.47±1.17)%、(35.83±0.41)%、(9.71±1.27)%,125Ⅰ粒子近距离照射组分别为(40.47±0.64)%、(38.18±0.91)%、(21.35±0.65)%;5-FU组分别为(37.92±0.32)%、0、(62.08±1.03)%;联合组(11.28±0.85)%、0、(88.72±0.33)%。三个治疗组细胞周期位于G0-G1、S、G2-M期的比率与对照组差异明显,且差异具有统计学意义。细胞培养48小时后,对照组BEL-7402细胞周期位于G0-G1、S、G2-M期的比率分别为(66.34±0.45)%、(27.52±0.88)%、(5.48±0.89)%,125Ⅰ粒子近距离照射组分别为(58.26±0.34)%、(13.8±0.25)%、(28.26±0.82)%;5-FU组分别为(27.52±0.21)%、0、(72.48±0.22)%;联合组(9.76±0.89)%、0、(90.72±0.28)%。三个治疗组细胞周期位于G0-G1、S、G2-M期的比率与对照组差异明显,且差异具有统计学意义
2、细胞培养48小时后,对照组凋亡指数为(1.26±0.21)%,25I粒子近距离照射组为(9.5±1.01)%;5-FU组为(10.05±0.57)%;联合组为(24±0.32)%。三个治疗组凋亡指数与对照组差异明显且具有统计学意义。
结论:1、125I粒子近距离照射和低浓度5-FU持续作用均可改变BEL-7402细胞周期分布,阻滞细胞于G2-M期,但125I粒子近距离照射对细胞周期的阻滞作用不随时间变化,5-FU对细胞周期的阻滞作用随着作用时间延长而增强;二者联合应用对细胞周期的阻滞作用增强。
2、125I粒子近距离照射和低浓度5-FU持续作用均可使BEL-7402细胞的凋亡率增加,二者联合凋亡率增加。