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研究背景血府逐瘀汤(Xuefu Zhuyu Decoction, XFZYD)是临床上常用的活血化瘀经典方,有活血化瘀、行气止痛之功效。该方在传统中医学主要用于胸中血瘀之证,治疗气滞血瘀所致的胸痛、头痛、内热烦闷、失眠多梦、心悸怔忡、急躁易怒等病症,现代医学中常用于治疗冠心病心绞痛、血管及外伤性头痛等多种疾病。在中医理论的指导下,该方不仅可以治疗血瘀引起的出血性疾病,还可以用于闭经等血行不畅之病症,应用非常广泛。最近研究显示,同为血府逐瘀汤含药血清(Xuefu Zhuyu Decoction-Contained Serum, XFZYD-CS)的作用机理研究,有人发现该方作用机制可能与XFZYD促进血管新生相关,也另有研究者表明XFZYD可能与抑制血管新生有关。XFZYD的作用机理引起人们广泛关注,其是否具有双向调节作用,还是其他因素导致,值得进一步深入研究。研究目的为了进一步研究血府逐瘀汤的功效,对该方的物质作用基础有更深入的了解,本研究采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)、液相色谱-质谱-质谱联用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry/Mass Spectrometry, LC-MS/MS)等分析技术对血府逐瘀汤大鼠含药血清、空白血清的成分进行了初步研究,通过定性、定量分析,初步筛选了XFZYD-CS的主要成分——芍药苷,以期逐步明确XFZYD-CS中的主要药物成分并定量分析。研究方法SD大鼠经血府逐瘀制剂灌胃、取血、分离血清,血清样品用乙腈沉淀蛋白法样品前处理后,用LC-MS/MS法测定含药血清中的芍药苷浓度。色谱柱为Atlantis(?) T3(2.1×100mm3μm),柱温：40℃,流速：0.3mL/min,进样量：2μL流动相：A：0.05%甲酸水溶液；B：甲醇,梯度洗脱。离子源：电喷雾(ESI)电离源,源温：325℃,检测模式：负离子检测,干燥气流量(Gas Flow):11L/min,雾化器压力(Nebulizer):45psi,采集条件：芍药苷479→120.9,裂解电压：150V,碰撞电压：25V。研究结果1、芍药苷检测浓度在9.14-230.0ng/mL内线性关系良好,回归方程为Y=1.1666X-7.2314(r=0.9983)。最低定量限为9.14ng/mL。2、血府逐瘀胶囊含药血清中芍药苷的浓度：高剂量组含药血清芍药苷的平均值为55.97ng/mL,SD为13.77%,RSD为24.6%。低剂量组平均值为8.38ng/mL, SD为1.84%,RSD为21.9%。中剂量组平均值为23.77ng/mL,SD为5.58%,RSD23.5%。3、经统计学分析,血府逐瘀汤含药血清低、中、高三个剂量组中芍药苷的浓度有显著差异。结论本研究以HPLC.LC-MS/MS等检测技术对血府逐瘀汤含药血清、空白血清进行了初步分析研究,确立了大鼠血清中芍药苷的LC-MS/MS检测方法,对血府逐瘀制剂含药血清中所含芍药苷进行了定量分析。本研究建立的大鼠血清中LC-MS/MS测定法,操作简便,灵敏度高,结果准确,样品稳定性良好。经统计学分析,血府逐瘀汤含药血清低、中、高三个剂量组中芍药苷的浓度有显著差异。其含药血清中芍药苷浓度的差异,是否构成血府逐瘀汤不同药物作用的基础,还需进一步研究验证。