【摘 要】
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目的:探究肿瘤血管破坏剂CKD-516对人肝癌细胞HepG2的抑制作用和潜在机制。此外,通过构建VX2兔肝癌模型,探究血管破坏剂CKD-516联合经导管动脉栓塞术（Transcatheter Arterial Embolization,TAE）治疗肝癌的效果和机制。材料和方法:体外实验:常规条件下,利用不同浓度的CKD-516与不同的作用时间对HepG2细胞进行干预,CCK-8法检测CKD-516
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目的:探究肿瘤血管破坏剂CKD-516对人肝癌细胞HepG2的抑制作用和潜在机制。此外,通过构建VX2兔肝癌模型,探究血管破坏剂CKD-516联合经导管动脉栓塞术（Transcatheter Arterial Embolization,TAE）治疗肝癌的效果和机制。材料和方法:体外实验:常规条件下,利用不同浓度的CKD-516与不同的作用时间对HepG2细胞进行干预,CCK-8法检测CKD-516对肿瘤细胞增殖的抑制作用,Transwell实验评价CKD-516对肿瘤细胞迁移和侵袭能力的影响,Western Blot检测CKD-516对β-微管蛋白（β-Tubulin）表达的影响。体内实验:构建VX2兔肝癌移植模型,将其分成以下4组:A组设为对照,经导管灌注生理盐水;B组为TAE组,经导管注入液态碘油后,明胶海绵颗粒栓塞血管;C组为CKD-516灌注组,CKD-516按9 mg/m~2体表面积经导管灌注治疗;D组为CKD-516+TAE组,配制液态碘油与CKD-516混合溶液,经导管灌注后用明胶海绵栓塞肿瘤血管。治疗七天后,处死全部实验动脉并进行病理解剖,评估肿瘤大体生长情况,通过病理染色评估肿瘤凋亡坏死情况,免疫组化法检测血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）和葡萄糖转运蛋白-1（Glucose transporters-1,Glut-1）的表达,CD31免疫组化染色计数肿瘤微血管数目,免疫荧光检测β-Tubulin的表达。最后,通过血液中肝肾功能指标参数评估CKD-516的毒副作用。结果:体外研究证实,CKD-516能够有效抑制HepG2细胞的增殖,抑制效果呈时间和浓度依赖性。此外,CKD-516抑制HepG2细胞的侵袭和迁移,同时降低β-Tubulin的表达。体内研究表明,CKD-516联合TAE治疗组（D组）造成肿瘤大面积坏死,显著抑制肿瘤的生长,相较于单纯TAE治疗组（B组）、CKD-516灌注组（C组）和对照组（A组）,D组能够进一步增加肿瘤坏死率,抑制肿瘤生长（P＜0.001）。CKD-516抑制β-Tubulin的表达,从而破坏现存的肿瘤血管,与对照组相比,D组β-Tubulin表达降低,微血管密度减少（P＜0.01）。此外,免疫组化结果表明,联合治疗组（D组）VEGF和Glut-1表达降低（P＜0.05）。最后,血清生化检查证明CKD-516会造成一过性肝功能损害,治疗七天后恢复正常。结论:肿瘤血管破坏剂CKD-516通过抑制肿瘤血管内皮细胞微管聚合及抗肿瘤增殖发挥作用。相较于单纯栓塞或药物灌注治疗,CKD-516联合TAE治疗能够提高肝癌介入治疗后肿瘤缺血缺氧坏死程度,增强介入栓塞的抗肿瘤治疗效果。
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