稻瘟菌REMI突变体库的构建及AVR-Pia的克隆

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:marcomak99
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稻瘟菌(Magnaporthe grisea)可侵染多种禾本科植物,是引起水稻稻温病的病原真菌.M.grisea与水稻间的相互作用符合基因对基因关系,现已作为模式系统之一来研究植物病原真菌与植物的互作机理.研究M.grisea的致病性及其变异的分子机理对于控制稻瘟病具有重要应用意义.经过许多学者的大量研究和努力,现已确定稻瘟菌的基因组有7条染色体,约含38~40Mb;并已建立了稻瘟菌的遗传图谱和部分染色体的物理图谱.稻瘟菌基因组的全序列测定和EST测序正在进行之中,这些预示着稻瘟菌功能基因组研究已经开始.为了确定每个基因的功能,建立插入突变体库是十分必要的,这也是功能基因组研究的一个重要方面.该研究利用限制性内切酶介导的方法,采用KpnⅠ、HindⅢ、SacⅠ和SmaⅠ分别线性化的pUCATPH转化了M.GriseaP131小种,分别获得了2973、3685、2883和2804共12345个转化体.为分析质粒整合特性,从上述限制性内切酶介导转化所得到的转化体中各随机抽取17个转化体,进行了基因组Southern分析.该研究的一个重要组成部分是作者对从SacⅠ介导的转化群体中筛选得到一株对水稻品种爱知旭(含有抗病基因Pia)特异性发生改变了的突变体MS220进行分子遗传学分析.
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