固定化亚硝酸菌反硝化菌协同除氨氮废水及生物膜观察

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传统的生物脱氮过程由好氧硝化和厌氧反硝化两个部分组成。由于传统工艺操作复杂和成本高等缺点,研究者陆续提出了很多新的生物脱氮工艺。如厌氧氨氧化工艺(ANAMMOX)、短程硝化反硝化工艺(SHARON)、基于亚硝酸盐的全自养脱氮工艺(CANON)、氧限制自养型硝化反硝化工艺(OLAND)等。本论文的技术路线是利用亚硝酸菌将氨氮氧化到亚硝酸氮的阶段,然后期望好养反硝化细菌将亚硝酸氮转化成氮气,属于有氧短程硝化反硝化的工艺。本工艺与传统的全程硝化反硝化反应相比,整个过程的供氧量节约了25%;其次,由于两种菌都为好(兼)氧菌,避免了SHARON工艺中的间歇曝气操作,使得亚硝酸盐能迅速被反硝化菌利用,大大简化了脱氮过程。本文分离得到了一株亚硝酸菌,对其进行了一系列的形态学和生理生化实验鉴定,以及Biolog的系统分析。初步确定亚硝酸菌二号菌株为人苍白杆菌(Ochrobactrum anthropi)并将其命名为Ochrobactrum sp.CZ。对其培养基成分和生长条件进行了优化。结果如下:(NH42SO4 0.71g,NaAC 4.4g,NaCl 3.0g,FeSO4 0.03g,Fe2(SO43 0.03g,K2HPO4 1.0g,MgSO4 0.03g,CaCl2 0.5 g,H2O1000ml。初始培养基pH=8.5,培养温度28-30℃,装样量20%,摇床转速为120r/min。经优化培养基培养所得的细菌在数量明显比优化前多,且对氨氮的降解率可以从初始的70%左右上升到90%以上。对实验室已分离保存的好氧反硝化菌FX进行了鉴定。发现其与粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)的相似性达到85%,将其命名为Alcaligenes sp.CZ。该菌能在DO为8mg/L的条件下生长并能在两天内降解200mg/L的硝酸盐;初始氮浓度上升到550mg/L以上会对Alcaligenes sp.CZ有一定的抑制作用。分别将两种菌用海藻酸钙(CA)包埋固定化细胞、聚氨酯泡沫(PUF)固定化细胞、海藻酸钙吸附生物膜细胞和游离细胞方法处理模拟氨氮废水。结果发现,各种固定化细胞方法的降解能力明显比游离细胞方法强。其中,CA包埋细胞法效果最好,可以在24h内将23mg/L初始氨氮完全降解,是游离细胞法的2.5倍;另外比较了溶氧对降解氨氮的影响,结果表明,高溶氧环境对氨态氮去除有利,而低溶氧环境对亚硝态氮积累有利。表面吸附生物膜方法显示了良好的除氮能力。通过核酸染料染色,在荧光显微镜下进行了两种细菌在CA表面的形成生物膜表征方法的探索。同时还初步考察了不同盐浓度对生物膜形成的影响,发现生物膜的结果,数量与细菌脱氮效果存在一定相关性。
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