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目前针对脑梗死的临床和实验研究，主要集中在病灶局部，试图通过抢救半暗带濒临死亡的细胞、减少梗死灶的面积，以达到降低脑梗死致死和致残率的目的。在动物实验中被证明有效的多种神经保护药物，在临床实践中却未见明显疗效。临床影像学研究显示，脑梗死治疗效果差不仅由于梗死局部的神经元死亡后再生困难，还与脑梗死造成远隔部位的损伤有关。
由于脑局部梗死后远隔部位损伤，所出现的症状不典型、无明显特异性，或者被原发病灶所掩盖，在临床上，远隔部位损伤的相关症状不容易被发现。随着现代神经影像学的发展，尤其是各种功能影像学的出现，远隔部位损伤的病灶能被早期发现，而且病灶与正常组织的区别更加明显，远隔部位的损伤也逐渐被关注。脑局部梗死后远隔部位的损伤，早期是由于血流代谢不耦合、递质代谢紊乱所致的可逆性神经功能联系不能；晚期由于远隔部位与梗死灶相联系的神经纤维的轴突变性，导致远隔部位不可逆的进行性萎缩或变性。动物实验证实，一侧大脑中动脉皮层支阻塞所致的大脑皮层梗死，能导致非缺血区的丘脑、黑质等进行性的神经元继发性变性或凋亡。这种远隔部位损伤机制包括远隔部位的代谢紊乱、兴奋性毒性、凋亡等。但至今并未解释为什么在脑梗死急性期后，随着梗死灶的坏死组织液化、形成中风囊，梗死灶体积不再改变，而远隔部位的损伤仍在进行性加重。远隔部位的损伤的机制还有待进一步阐明。
有研究认为，中枢神经系统(CNS)局部损伤后，损伤原发灶和损伤远隔部位的轴突变性的机制是不相同的。缺血灶原发性损伤是直接创伤造成组织死亡的部位，损伤部位的组织碎片主要由侵入血源性的巨噬细胞快速清除，而在远离原发灶的变性轴突，需经过CNS的小胶质细胞捐募、活化，转化成巨噬细胞后，才能被清除，需要相当长的时间。故在远隔部位，移走这些变性组织的时间较损伤原发灶延迟很多，导致了位于损伤轴突及其磷脂碎片上的轴突生长抑制因子(如Nogo-A等)在变性的神经纤维附近持续存在，形成轴突再生的抑制性环境。轴突生长相关的抑制因子包括Nogo-A、磷脂相关糖蛋白(MAG)、少突胶质细胞髓鞘相关糖蛋白(Omgp)。Nogo-A主要在中枢神经系统(CNS)的少突胶质细胞表达，中枢神经系统损伤是否引起Nogo-A的过表达，还存在很大的争议；但由于Nogo-A能明显地抑制轴突的生长、细胞的扩增和诱导生长锥的塌陷，而阻断Nogo-A作用的相关干预方法能显著地促进CNS轴突再生和神经功能恢复，故近年来，对于Nogo-A的研究倍受关注。Nogo蛋白属于内质网蛋白(Reticulon)家族成员，在三种异构体(Nogo-A、Nogo-B和Nogo-C)中，Nogo-A最长，含有1163个氨基酸，分子量为180-260kD，全长存在两个抑制性功能域：一个是位于细胞表面的Nogo-66，另一个是长的氨基端区(Amino-Nogo)，这两个结构域在抑制轴突生长方面发挥协同作用。NEP1-40为Nogo-66(1-40)拮抗肽，能减少CNS磷脂的轴突生长抑制作用。GrandPre T和Li S等发现NEP1-40能促进脊髓损伤小鼠模型的CST，红核脊髓束(RST)的增生、提高生长相关蛋白的表达，这些增生的轴突在促进损伤脊髓的神经功能的恢复中起了重要的作用。
然而，到目前为止，尚不清楚Nogo-A等中枢抑制因子是否通过影响远隔部位的轴突变性的过程，而参与远隔部位神经元损伤。皮层脑梗死后远隔部位(如丘脑、黑质、脊髓灰质等)的Nogo-A表达、Nogo-A与局灶性脑梗死后远隔部位神经元损伤的关系，以及其对神经功能的影响尚未见研究报道。
本研究把脑梗死灶局部->神经通路(轴突变性)->远隔部位损伤作为一个整体来研究，通过论证三者的辩证关系，来证实Nogo-A是否参与了远隔部位的损伤。本研究首先观察了脑梗死后的神经功能和梗死灶体积，大脑皮层梗死后远隔部位丘脑、黑质和脊髓的继发性神经元死亡和轴突变性，及其Nogo-A在丘脑、黑质和脊髓的表达；然后用NEP1-40阻断Nogo-A的作用，探讨Nogo-A与继发性神经元死亡和轴突变性的相互关系，来研究Nogo-A对远隔部位的损害作用及其神经功能的影响。本实验为远隔损伤的发生机制和临床意义提供了动物实验基础。
材料与方法:
选用体重60-90g的SD大鼠300只，采用双肾双夹法复制成易卒中型肾性高血压大鼠(RHRSP)模型，术前1天以及术后每周测量血压1次。RHRSP术后10～12周，选取血压稳定在180mmHg以上，无自发性脑卒中表现的高血压大鼠240只，制备右侧大脑中动脉皮层支闭塞(MCAO)模型。从成功复制MCAO的大鼠中随机选取180只，其中60只作为MCAO组，60只作为溶剂组，60只作为NEP140组。另随机选取稳定形成高血压的RHRSP 60只，仅暴露右侧大脑中动脉(MCA)，但不凝闭动脉，作为假手术组。MCAO术后24h，NEP1-40组采用渗透性微泵，持续侧脑室内注入NEP1-40，剂量为89μg/kg/d；溶剂组只注入不含NEP1-40的等量0.0l M PBS(pH=7.4)；假手术组和MCAO组不给予任何脑室内注射。入组大鼠均在MCAO术前进行相应神经功能评分训练，MCAO术后1、2、3、4周，从。MCAO组、溶剂组和NEP1-40组随机选取10只大鼠进行神经功能评分。
各组大鼠在神经功能评分后，于MCAO术后1、2和4周分别取10只，灌注固定后取脑，行冰冻切片，片厚30μm，分别给予Nissl染色，原位末端标记(Tunel)法行丘脑、黑质的凋亡检测，免疫组织化学法检测丘脑腹后核(VPN)、黑质网状核(SNR)和脊髓的Nogo-A，APP，GAP-43，MAP-2，GFAP，RIP，以及免疫荧光双标法检测丘脑VPN、黑质SNR和脊髓的Nogo-A/APP、Nogo-A/GAP-43、Nogo-A/MAP-2、Nogo-A/RIP。另每组随机选取30只大鼠，行Western blotting检测丘脑、黑质的Nogo-A蛋白。
免疫组化和Western blotting检测结果采用计算机辅助软件分析系统(Image-Pro-Plus，IPP)进行定量分析。全部数据均采用SPSS for Windows 10.0进行统计分析，行单因素方差分析(ANOVA)，比较不同时间点假手术组、MCAO组、溶剂组和NEP1-40组之间差异的显著性，P<0.05时，有显著性意义。数据以均值±标准差表示。
结论:
1．RHRSP大鼠：MCA皮层支闭塞后1周，梗死侧丘脑VPN和黑质SNR出现继发性神经元死亡。随着缺血时间的延长，丘脑vPN和黑质SNR神经元进行性丢失，其丢失的程度与丘脑VPN和黑质SNR进行性的轴突变性相关。给予NEP1-40阻断Nogo-A，在MCAO术后各时间点，均不影响梗死灶的体积，却减轻丘脑VPN和黑质SNR继发性神经元损伤。
2．MCAO术后各时间点，丘脑VPN和黑质SNR的Nogo-A的表达在增生少突胶质细胞持续性增高，Nogo-A阳性少突胶质细胞分布在损伤的轴突周围。Nogo-A与APP的表达变化规律一致，与GAP-43、MAP-2的表达变化规律相反，NEP1-40干预使APP的表达减少，GAP-43、MAP-2的表达增多；故Nogo-A促进了轴突变性，抑制了轴突再生。
3．脑梗死局部病灶是远隔部位丘脑和黑质损伤的触发因素，脑梗死后同侧丘脑和黑质Nogo-A表达增高形成的抑制性环境，导致的轴突进行性变性是这些远隔部位神经元继发性损伤的直接原因。
4．在MCAO后4周，本研究所采用的方法未发现脊髓有相应的神经元继发性损伤。